Клеммы по бакшееву: Наложение клемм на параметрий в Санкт-Петербурге

Содержание

Наложение клемм на параметрий в Санкт-Петербурге

Наложение клемм на параметрий – методы купирования акушерских кровотечений, осуществляемые путем наложения хирургических зажимов на стенки матки. К такому способу прибегают при неэффективности медикаментозного и механического гемостаза. В акушерстве используются две методики наложения клемм – по Бакшееву и по Генкелю-Тиканадзе. В первом случае (наложение клемм по Бакшееву) после фиксации и низведения шейки матки производится циркулярное наложение окончатых зажимов через одинаковое расстояние по всей окружности нижнего сегмента матки. Гемостатический эффект основан на сдавливании боковых стенок матки и рефлекторном сокращении миометрия. При втором методе (по Генкелю-Тиканадзе) кровоостанавливающие зажимы накладываются на боковые ребра матки перпендикулярно, а гемостаз достигается путем пережатия маточных артерий.

Цены:

0 адресов, цен, средняя цена ?р.

по Бакшееву

по Генкелю-Тиканадзе

Фильтр:

Круглосуточные

Показать все фильтры

Сбросить

по Бакшееву / по Генкелю Круглосуточные Сортировка

По умолчанию

сбросить фильтр

Найдено 0 центров

Скрыть фильтр

Мы не смогли обнаружить ни одной клиники – возможно, плохо искали. Если у Вас есть информация о том, где выполняют наложение клемм на параметрий в Санкт-Петербурге – напишите нам.

Цены в других городах

Наложение клемм по Генкелю-Тиканадзе — Студопедия

Показание: гипотоническое маточное кровотечение.

Техника: после опорожн.моч.пузыря шейка матки низводится (в зеркалах) пулевыми щипцами кнаружи от вульвы, затем со стороны влагалищных сводов накладываются 2 кишечных зажима перпендикулярно к шейке матки, чем обеспечивается обескровливание матки.

Наложение клемм по Бакшееву.

Показание: кровотечение после рождения последа.

Техника: после опорожн.моч.пузыря шейка матки низводится (в зеркалах) пулевыми щипцами кнаружи от вульвы, затем на шейку матки накладывают кишечные зажимы на 1,3,5,7,9,11 часах соответственно парал-но к уже наложенным пулевым щипцам, чем достигается обескровливание матки.

КТГ.

Кардиотокография-запись ЧСС плода парал-но с сокращением матки.

Классиф.типов вариабельности базального ритма:

-немой ритм,хар-ся низкой амплитудой,-0,5 уд/мин;

-слегка ундулирующий-5-10 уд/мин;

-ундулирующий-10-15 уд/мин;

-сальтаторный-25-30 уд/мин.

Критерии норм.КТГ:

-базальн.ритм в пределах 120-160 уд/мин;

-амплитуда вариабельности базальн.ритма-5-25 уд/мин;

-децелерация отсут.или отмеч.спорадические и очень короткие децелерации;

-регистрир.2 акцелерации и более на протяжении 10 мин записи.


Начин.исследование СД плода с НСТ.

Нестрессовый тест(НСТ).Закл-ся в изучен.реакции ССС плода в ответ на его движения. НСТ яв-ся реактивным, когда в течен.20 мин набл-ся 2 учащения с/б плода или более по меньшей мере на 15 ударов в мин и продол-тью не менее 15 с,ассоциирующихся с движениями плода.

Окситоциновый тест. В/в вводят р-р окситоцина, содерж.0,01 ЕД в 1 мл изотонич.р-ра NaCl или 5% р-р глюкозы. Тест можно оценивать,если в течен. 10 мин при скорости введения 1 мл/мин наб-ся не менее 3 сокращ.матки. В ответ на сокращение матки наблюдается Нерезко выраженная кратковременная акцелерация или ранняя непродолжительная децелерация.

Проба со стимуляцией сосков является более безопасным, простым и экономичным контрактильным тестом. Метод заключается в раздражении одного соска (через одежду) в течении 2 минут или до появления сокращений матки. Если в ответ на раздражение соска не возникает 3 сокращений матки за 10-мин интервал, проводится повторная стимуляция.

Атропиновый тест.В/в вводят 1,5 мл 0,1% р-ра атропина сульфата в 20 мл 40% р-ра глюкозы или 0,5% р-ра NaCl. До введения атропина запись ЧСС производят в течен.15-20 мин,после введения –до возврашения ЧСС к исход.уровню. Физиол.р-ция СД плода под влиянием атропина проявл.в увелич.ЧСС на 25-35 в мин и более, кот.наступ. ч/з 4-10 мин и прод-ся до 70 мин.

52.Молозивный тест, КПИ. Из молочн.железы, путем надавливания на околососковый кружок, выдел-ся секрет, он вытирается стерильн.ватой. След.капля помещ-ся на предмет.стекло и исслед.под микроскопом. При преобладании молозивных телец-перенашивания нет. При преобладании жировых шариков-данные за перенашивание.


Кариопикнотический индекс. Под влиянием гормонов яичников происходят циклические изменения в слизистой оболочке влагалища, особенно в его верхней трети. В мазке из влагалища м.б. след.виды клеток плоск.многосл.эпит: а)ороговевающие,б)промежуточные,в)базальные. Кл-и 1го типа начинают преобладать по мере нарастания секреции яичниками эстрогенов. На основании определения количественных соотношений клеточных элементов можно судить о степени насыщенности организма эстрогенными гормонами или об их недостаточности. max число ороговев.кл-к выяв-ся в предовуляторные дни-80-88%, в раннюю фазу пролиферации-20-40%, в позднюю фазу секреции-20-25%.

Атравматическая клемма для остановки послеродового маточного кровотечения

 

Клемма предназначено для остановки послеродового маточного кровотечения. В основе конструктивного выполнения клеммы лежит единая фигурная пластина. Концевые участки пластины образуют зажимные губки, которые обеспечивают в сомкнутом положении пережатие сосудов или тканей. На рабочих поверхностях зажимных губок имеются полусферические выступы на одной из губок, и ответные выступам полусферические впадины на другой губке. Центральный участок пластины является участком ее изгиба. Этот участок соединяется с зажимными губками посредством перемычек. На каждой перемычке имеется упор, образованный за счет изгиба перемычки в сторону выступания возвышения полусферических выступов зажимной губки. Упоры образуют средство для перевода губок в разомкнутое положение. При использовании клеммы пережатие просвета маточного сосуда на выпуклой полусферической поверхности выступа и соответствующей ей полусферической впадине гарантирует прекращение кровотока в следующей в любом направлении ветке сосудов маточной артерии, поскольку именно такая поверхность обеспечивает все 360 градусов «охвата» зоны пережатия сосуда, то есть по всему кругу. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.

Полезная модель относится к области медицины, а именно: к оперативному акушерству и гинекологии, и касается конструкции устройства, которое предназначено для остановки послеродового маточного кровотечения, а также может быть использовано и при гинекологическом кровотечении. В частности заявляемое устройство может быть инструментом одноразового использования.

Известно использование, для усиления сокращений матки, наложения 3-4-х абортцанг (наложение клемм по Н.С.Бакшееву). При этом одну ветвь располагают на внутренней поверхности шейки матки, вторую – на наружной. Потягиванием рукояти зажимов, матку смещают вниз. Рефлекторное воздействие на шейку матки и возможное сдавливание нисходящих ветвей маточной артерии способствуют уменьшению послеродовой кровопотери. При прекращении кровотечения, абортцанги поочередно убирают (см. Бакшеев Н.С. «Маточные кровотечения». Киев, «Здоровье» 1966, 1970, 1975 гг.).

Известно использование, вместо клемм и абортцанг, щипцов с полукруглой рабочей частью зажимов, которые накладывают на шейку матки (см. Л.П.Пироговский «Щипцы для остановки маточного кровотечения в раннем послеродовом периоде». Медицинская библиотека на сервере MedLinks.ru., опубл. 18.08.2009).

Общим недостатком для этих средств является:

– травматическое, сдавливающее, компрессионное воздействие их на сжимаемые ими ткани шейки матки и маточные сосуды и нервы из-за общих для них недостатков в конструкции, а именно: а) все они выполнены из метала, чаще всего – стали, что обуславливает травматическое сдавливание тканей и склонность к самостоятельному «сползанию» инструментов с шейки матки под воздействием их собственной тяжести; б) пережатие тканей, сосудов при использовании этих инструментов проводится между двумя сближаемыми плоскими поверхностями с близким к прямоугольным гранями, что травмирует ткани; в) их кровоостанавливающее воздействие, как правило, распространяется только на нисходящую, меньшую ветвь маточной артерии, в силу того, что обе ветви у этих инструментов одинаковой длины, и их наружная ветвь упирается в вершину бокового влагалищного свода, а внутренняя их ветвь максимально может достичь только до внутреннего маточного зева, причем анатомически именно над внутренним маточным зевом в большинстве случаев и происходит анатомическое деление маточной артерии на нисходящую и восходящую ветвь.

Таким образом, все указание устройства (абортцанги, щипцы, зажимы, клеммы) пережимают только нисходящую, меньшую ветвь маточной артерии идущую от маточной артерии к шейке матки, в то время, когда большая часть маточной артерии – ее восходящая ветвь, питающая тело матки, плацентарную площадку, остается вне их досягаемости (а именно из тела матки и осуществляется послеродовое маточное кровотечение определяющее массивную кровопотерю), чем и обуславливается незначительная их эффективность. Во всех ранее известных кровоостанавливающих зажимах и клеммах рабочая поверхность была всегда абсолютно сомкнутой, с соприкасанием зажимающих поверхностей по прямой линии, чем и достигалось сдавливание тканей и пережатие кровоточащих сосудов, правда с избыточной их травматизацией.

Ближайшим аналогом к заявляемой полезной модели является известная конструкция кровоостанавливающего зажима для остановки послеродового маточного кровотечения, содержащего две перекрещивающиеся шарнирно соединенные бранши, каждая из которых разделена шарниром на зажимную ветвь с зажимной губкой на ее конце и рукоятку с элементом замкового механизма на ее концевом участке. Зажимная губка каждой из бранш имеет на стороне, обращенной к губке другой бранши, волнообразную, по крайней мере по всей протяженности губки, поверхность, образованную для одной из губок чередованием одинакового количества выступов и желобовидных впадин и для другой губки – выступами и расположенной или расположенными между ними желобовидной впадиной или впадинами с превышением количества выступов по отношению к количеству впадин на единицу. Параметры впадин и выступов выбраны из условия обеспечения при смыкании губок не только сдавливание тканей, сосудов, но и, одновременно, их изгиб по кривой волнообразной поверхности губок (см. RU 102884 U1).

При всех преимуществах ближайшего аналога над всеми выше перечисленными, ранее известными устройствами, зажим по патенту RU 102884 имеет, однако, ряд существенных, как оказалось, недостатков, а именно:

1. в случае расположения веточки маточной артерии в тканях шейки матки соответственно протяжению, то есть параллельно расположению желобовидной впадины, достичь эффективное пережатие такой веточки артерии будет затруднительно, так как в желобовидной впадине изгиб сосуда, обеспечивающий остановку кровотечения, достичь невозможно:

2. наличие в ближайшем аналоге перекрещивающихся бранш, находящихся во влагалище и частично выступающих из него, существенно затруднит проведение ручного обследования полости матки, необходимость выполнения которого является обязательным при массивном маточном послеродовом кровотечении для исключения разрыва матки или для исключения нахождения в полости матки плацентарных недостатков или сгустков крови.

Предлагаемая полезная модель направлена на решение задачи по повышению эффективности остановки послеродового маточного кровотечения и минимизации травматического воздействия на маточные ткани и сосуды с увеличением оперативных возможностей и с сохранением матки за счет временного прекращения маточного кровотока без вхождения в брюшную полость путем трансвагинального интрацервикального (внутривлагалищного, через канал шейки матки) введения инструмента с последовательным пережатием правой и левой маточных артерий с их восходящими, к телу матки, и с нисходящими, к шейке матки ветвями, равно как и в следующих в любом направлении их сосудистых ветвей.

Технический результат, который может быть достигнут при реализации полезной модели, заключается в улучшении исхода лечения послеродовых маточных гипотонических кровотечений в условиях, когда снижен тонус (т.е. сохранена еще способность матки к сокращению), а также и при атонических маточных кровотечениях, когда отсутствует тонус матки и способность к сокращению, и даже в случаях разрыва стенки матки в родах, за счет обеспечения прекращения поступление крови к матке по маточным артериям (правой и левой) и их ветвям на время, достаточное для осуществления всех механизмов физиологического свертывания крови, реализующихся в течение короткого времени, максимум 7-10-ти минут, с исключением кровопотери в течение этого времени и с сохранением при этом, в конечном результате, ее репродуктивной, детородной функции.

Для достижения указанного технического результата предлагается клемма для остановки послеродового маточного кровотечения, содержащая две зажимные губки, обеспечивающие в сомкнутом положении пережатие сосудов или тканей и имеющие рабочие зажимные элементы на зажимных поверхностях. В основе конструктивного выполнения клеммы лежит единая плоская фигурная пластина. Концевые участки пластины образуют зажимные губки. Центральная часть пластины является участком ее изгиба, при сгибании которого обеспечивается перевод губок в сомкнутое положение. Участки, соединяющие центральную часть и зажимные губки образуют перемычки, поперечный размер каждой из которых меньше поперечного размера центральной части пластины. Рабочие элементы зажимных губок представляют собой полусферические выступы на одной из губок и полусферические впадины на другой губке, ответные указанным полусферическим выступам. На каждой из перемычек имеется упор, образованный за счет изгиба соответствующей перемычки в сторону возвышения (выступания) полусферических выступов зажимной губки, при этом указанные упоры образуют средство для перевода губок в разомкнутое положение.

Преимущественно, полусферические выступы на одной из губок и соответственно полусферические впадины на другой губке расположены, по меньшей мере, в два параллельных ряда.

Благодаря наличию в заявляемой конструкции клеммы полусферических выступов и впадин на всей поверхности смыкающихся, пережимающих, кровоостанавливающих поверхностей и устраняются недостатки ближайшего аналога, так как именно прижимание, пережатие просвета маточного сосуда на выпуклой полусферической поверхности выступа и соответствующей ей полусферической впадине и гарантирует прекращение кровотока в следующей в любом направлении ветки сосудов маточной артерии, поскольку именно такая поверхность обеспечивает все 360 градусов «охвата» зоны пережатия сосуда, то есть по всему кругу. При этом, выполнение клеммы на основе единой пластины значительной упрощает технологию ее изготовления и повышает удобство в пользовании.

Существо полезной модели поясняется чертежами, где:

на фиг.1 показана клемма для остановки послеродового маточного кровотечения в разомкнутом положении, вид сверху;

на фиг.2 – то же, вид сбоку;

на фиг.3 – клемма для остановки послеродового маточного кровотечения в сомкнутом положении, вид сбоку.

В основе конструктивного выполнения предлагаемой клеммы лежит единая плоская фигурная пластина 1, длиной примерно 30 см, толщиной, примерно 1 мм. Пластина выполнена из упруго-деформируемого материала, например, из медицинской нержавеющей стали или из подходящей пластмассы. Наиболее щадящее воздействие на ткани и сосуды достигается при выполнении клемм из медицинской пластмассы.

Концевые участки пластины 1 образуют зажимные губки 2 и 3, размер каждой из которых в продольном относительно длины пластины 1 направлении составляет примерно 3 см и в поперечном направлении – примерно 6 см. Центральный участок 4 пластины 1 является участком изгиба пластины и может иметь, как показано на фиг.1, форму шестиугольника. При сгибании центрального участка 4 по средней линии 5 пластины обеспечивается, как будет понятно далее, перевод губок 2 и 3 в сомкнутое положение. Стороны 6 и 7 зажимных губок 2 и 3 и сторона 8 центрального участка 4 губок расположены на одном уровне по линии 1а пластины 1 и противолежащие им стороны 9 и 10 зажимных губок 2, 3 и сторона 11 участка 4 расположены на одном уровне по противоположной линии 16 пластины 1.

Центральный участок 4 соединен с зажимными губками 2, 3 через перемычки 12 и 13. Поперечный «L1» размер каждой перемычки меньше (в значительной степени) поперечного размера «L 2» центрального участка 4 пластины 1.

На губках расположены рабочие зажимные элементы: на одной из губок (поз.3) это полусферические выступы 15 и на другой губке 2 – полусферические впадины 14, ответные полу сферическим выступам 15. Полу сферические впадины 14 выполнены на зажимной губке 2, предпочтительно двумя параллельными близкорасположенных друг к другу рядами, максимально приближенными друг к другу, с одинаковым количеством впадин 14 в рядах. Диаметр окружности в основании впадины 14 составляет примерно 1 см и глубина впадины примерно 0,5 см. Полусферические выступы 15 расположены на плоской поверхности зажимной губки 3 в полном соответствии с расположением полусферических впадин 14 на губке 2. Размеры выступов 15 меньше размеров впадин 14 и составляют: диаметр окружности в основании выступа 15 примерно 8 мм и высота выступа – примерно 4 мм.

При таком выполнении при наложении зажимной губки 3 на зажимную губку 2 полу сферические выступы 15 точно будут погружены в полусферические впадины 14. Разница размеров полу сферических выступов и впадин всегда будет равной «двойной» толщине пластины 1. Одновременное соразмещенное выполнение и выступов и впадин обеспечено при воздействии пресса с полусферическими выступами на наложенные друг на друга две пластины тонкой медицинской нержавейки или при воздействии нагретых полусферических выступов на наложенные друг на друга пластинки заготовки из медицинской пластмассы. Таким образом, полусферические выступы всегда будут размещаться над полусферическими впадинами, так как они выполнены соразмещенными на своих зажимных губках,

Перемычки 12 и 13, соединяющие зажимные губки 2 и 3 с центральным участком 4 имеют в поперечном сечении размер предпочтительно 5 мм. Сторона 16 перемычки 13 лежит на осевой линии 17 пластины 1 и находится от линии 1а на большем расстоянии, чем сторона 18 перемычки 13 от линии 1а. В свою очередь сторона 19 перемычки 12 лежит на осевой линии 17 пластины 1 и находится от линии 1а на меньшем расстоянии, чем, сторона 20 перемычки 12 от линии 1а. Таким образом, перемычки 12 и 13 смещены относительно осевой линии 17 в разные стороны.

На перемычке 12 имеется упор 21, а на перемычке 13 – упор 22. Каждый упор образован за счет изгиба соответствующей перемычки, в сторону выступания полусферических выступов 15, с образованием угла «» величиной 45°. Участки изгиба одной и другой перемычек примыкают к центральному участку 4. Упоры 21, 22 образуют средство для перевода зажимных губок 2 и 3 в разомкнутое положение.

В центральном участке 4, по его срединной (осевой) линии, по центру, выполнена прорезь 23 (длиной 4 см и шириной 5 мм) для браншей окончатого хирургического зажима.

Клемма используется следующим образом.

Бранши окончатого хирургического зажима проводят через прорезь 23 с расположением отверстия верхней бранши на верхний упор 22, а нижней бранши – на нижний упор 21. При сведении браншей окончатого зажима происходит передача давления, движения через, т.е. с помощью или посредством упоров 21, 22 на нижнюю перемычку 12 и верхнюю перемычку 13, которые и разводят находившееся до этого в состояния сведения зажимные губки 2 и 3, что позволяет завести устройство за губу шейки матки до верхней, самой дальней точки бокового свода влагалища, в проекции которой и происходит анатомическое разделение маточной артерии на ее восходящую и нисходящие ветви. При этом нижняя зажимная губка 2 остается снаружи, во влагалище, а верхняя зажимная губка 3 будет размещаться внутри в полости матки. После разъединения браншей окончатого зажима происходит сближение выступов 15 с впадинами 14, которые приближаются по направлению друг к другу, так как они выполнены соразмещенными друг против друга и в силу осуществления силы стремящейся к разгибанию сжатого перед этим центрального участка 4. Поскольку матка кравоснабжается за счет правой и левой маточной артерии то и устройство накладывается поочередно и на правую и на левую половину шейки матки, что прекращает поступление крови к матке, чем и останавливается маточное кровотечение. Следует отметить, что перемещение нижней перемычки 12 и верхней перемычки 13 свободно осуществимо, так как перемычки выполнены по разные стороны от осевой линии устройства (клеммы). Положительным моментом устройства является так же то, что в момент его использования, на своем нерабочем конце клемма представляется полукружной поверхностью полукругом согнутого центрального участка 4, обтекаемость поверхности которого не мешает хирургу врачу в проведении обязательного при кровотечении ручного обследования стенок полости матки с целью удаления из нее сгустков крови или тканей плаценты и для исключения наличия ее разрывов.

Следует дополнительно пояснить, что взаимное прижатие выступов 15 и впадин 14 обеспечивается за счет заведения нижней зажимной губки 2 под верхнюю зажимную губку 3 и перекрещивания выступающих упоров 21, 22, испытывающих силу стремящуюся к разгибанию плавно согнутой, точнее полусгибаемой перед использованием по ее поперечной срединной оси, шестиугольного центрального участка 4, а разведение зажимных губок 2 и 3, необходимое для их наложения на верхнюю треть боковых половин шейки матки достигается нажатием, дополнительно привлекаемого к использованию в данном случае окончатого хирургического зажима, округлые окна которого накладываются, соответственно на нижний и верхний упоры 21, 22.

Таким образом, при сжимании, сближении окончатых браншей окончатого хирургического зажима со смыканием зубчатой кремальеры зажима в замок и происходит передача давления упорами 21, 22 на зажимные губки 2 и 3 с разведением губок с достижением щели между ними примерно в 2 сантиметра, в которую и вводятся боковые половинки шейки матки, и при достижении зажимными губками максимальной вершины верхней трети боковых половинок шейки матки, хирург размыкает кремальеру окончатого хирургического зажима, в результате чего и происходит сближение зажимных губок с бережным прижатием тканей и размещенных в них веток маточной артерии, поскольку прижатие осуществляется на обтекаемой поверхности полу сферических выступов 15, то есть на все 360 градусов «охвата» зоны пережатия сосуда, то есть по всему кругу. Такое пережатие просвета маточного сосуда гарантирует прекращение кровотока в следующей в любом направлении ветки сосудов маточной артерии. Фиксация же окончатого зажима на клеммах осуществляется за счет выполнения фиксирующей прорези длиной, примерно 4 см и шириной примерно 5 мм, по осевой линии, по центру в шестиугольном центральном участке 4, в которой размещаются рабочие концы браншей окончатого зажима, при их одновременном сведении, осуществляемом следом за размещением в окнах окончатого зажима верхнего и нижнего упоров 21 и 22 клемм.

Две перекрещивающиеся перемычки (нижняя 12 и верхняя 13) клемм выполнены изогнутыми во фронтальной плоскости с образованием угловых упоров 21 и 22, нажатие на которые и обеспечивает раскрывание зажимных губок 2, 3 клемм при их установке на шейку матки посредством обычного стандартного окончатого хирургического зажима, который после наложения клемм легко снимается и удаляется из шейки матки и влагалища, обеспечивая беспрепятственное проведение ручного контроля полости матки, которому полусогнутые поверхности шестиугольного участка 4 не помеха.

Эластичность центрального участка 4 сжатия в предлагаемых клеммах и выполняет ту роль щадящего воздействия на сосуды и ткани, которую и выполнял у аналога амортизационный ограничитель из медицинской резины в форме песочных часов.

1. Клемма для остановки послеродового маточного кровотечения, содержащая две зажимные губки, обеспечивающие в сомкнутом положении пережатие сосудов или тканей и имеющие рабочие зажимные элементы на зажимных поверхностях, отличающаяся тем, что в основе конструктивного выполнения клеммы лежит единая фигурная пластина, причем концевые участки пластины образуют зажимные губки, центральная часть является участком изгиба пластины, при сгибании которого обеспечивается перевод губок в сомкнутое положение, а участки, соединяющие центральную часть и зажимные губки, образуют перемычки, поперечный размер каждой из которых меньше поперечного размера центральной части пластины, при этом рабочие элементы зажимных губок представляют собой полусферические выступы на одной из губок и полусферические впадины на другой губке, ответные указанным полусферическим выступам, а на каждой из перемычек имеется упор, образованный за счет изгиба соответствующей перемычки в сторону возвышения полусферических выступов зажимной губки, при этом указанные упоры образуют средство для перевода губок в разомкнутое положение.

2. Клемма по п.1, отличающаяся тем, что полусферические выступы на одной из губок и соответственно полусферические впадины на другой губке расположены, по меньшей мере, в два параллельных ряда.

Публикации в СМИ

ТЕСТЫ ПО АКУШЕРСТВУ.

1. Какая методика кесарева сечения является наиболее распространенной:
А. классическое (корпоральное) кесарево сечение;
В. Кесарево сечение в нижнем маточном сегменте;
С. Экстраперитонеальное кесарево сечение;
Д. влагалищное кесарево сечение;
Е. ни одна из перечисленных выше.

2. Что следует предпринять в первую очередь при патологической кровопотере в раннем послеродовом периоде:
А. прижать аорту;
В. ввести средства, вызывающие сокращение матки;
С. наложить клеммы на шейку матки по Бакшееву;
Д. произвести ручное обследование стенок послеродовой матки;
Е. осмотреть мягкие родовые пути.

3. Тяжесть течение гестоза определяется:
1. степенью выраженности клинических признаков;
2. длительностью течения;
3. эффективностью проводимой терапии;
4. степенью выраженности фетоплацентарной недостаточности.

4.Укажите характерные клинические симптомы преэклампсии:
1. общие отеки;
2. головная боль;
3. АД выше 150/90 мм рт ст;
4. боли в эпигастральной области.

5. Какие осложнения возможны во время беременности при гипертонической болезни:
1. раннее развитие сочетанных форм гестоза;
2. преждевременной прерывание беременности;
3. фетоплацентарная недостаточность;
4. перенашивание.

6. Акушерская тактика при осложненном аппендиците при доношенной беременности предусматривает:
1. кесарево сечение;
2. кесарево сечение с последующей надвлагалищной ампутацией матки;
3. кесарево сечение с последующей экстирпацией матки;
4. консервативное ведение родов.

7. Классическое ручное пособие при тазовом предлежании предусматривает:
1. перевод ножного предлежания в смешанное ягодичное;
2. освобождение последующей головки;
3. сохранение сгибательного членорасположения плода;
4. освобождение плечевого пояса.

8. Железодефицитная анемия во время беременности связана с:
1. увеличением потребности организма в железе;
2. недостатком витаминов и железа в продуктах питания;
3. небольшим интервалом между родами;
4. хроническими заболеваниями желудочно-кишечного тракта.

9. Что характерно для клинического течения хронического пиелонефрита при беременности:
1. непостоянство симптомов;
2. развитие гестоза;
3. повторное обострение заболевания;
4. наличие гипохромной анемии.

10. Причины внутриутробной задержки роста плода могут быть:
1. гестоз;
2. внутриутробная инфекция;
3. длительная угроза прерывания беременности;
4. преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты.

11. При развитии матки Кувелера возможно:
А.образование ретроплацентарной гематомы;
В. инфильтрация мышечного слоя кровью;
С. нарушение сократительной функции;
Д. формирование ДВС-синдрома;
Е. все перечисленное выше.

12. Наиболее характерным клиническим симптомом предлежания плаценты является:
А. хроническая внутриутробная гипоксия плода;
В. снижение уровня гемоглобина и уменьшение количества эритроцитов в крови;
С. повторные кровянистые выделения из половых путей;
Д. артериальная гипотензия;
Е. угроза прерывания беременности.

ТЕСТЫ ПО ГИНЕКОЛОГИИ

1. При асците в дифференциально-диганостический поиск необходимо включить следующие заболевания:
А) гипотиреоз
В) коллагенозы
С) фиброму яичника
Д) хронический активный гепатит
Е) все перечисленное выше

2. Пороки развития внутренних половых органов наиболее часто сочетаются с пороками развития:
А) толстой кишки
В) производных нервной трубки
С) почек и мочевыводящих путей
Д) костей
Е) тонкой кишки

3. Современные методы лечения стрессового недержания мочи без пролапса гениталий:
А) физиотерапевтическое лечение
В) введение свободной синтетической петли (TVT)
С) передняя и задняя пластика стенок влагалища, ушивание фасции мочевого пузыря, леваторопластика
Д) передняя и задняя пластика стенок влагалища, леваторопластика, ушивание фасции мочевого пузыря с использованием проленовой сетки
Е) психитерапевтическое лечение

4. Объемное образование, пальпируемое в области придатков матки, может оказаться:
А) дополнительной петлей кишечника
В) опухолью кишечника
С) забрюшинной опухолью
Д) опухолью яичника
Е) дистопированной почкой

5. Синдром Мейгса характеризуется рядом признаков:
А) удвоением чашечно-лоханочной системы
В) анемией
С) аплазией влагалища
Д) гидротораксом
Е) асцитом

6. Симптомы, характерные для синдрома Рейтера включает:
А) уpeтpит
В) коньюнктивит
С) эндометрит
Д) полиартрит
Е) сальпингит

7. Факторами риска возникновения первичного остеопороза являются:
А) курение
В) астеническое телосложение и масса тела менее 57кг
С) избыточная масса тела
Д) преждевременное снижение функции яичников
Е) наследственная предрасположенность

8. Клиническими проявлениями климактерического синдрома являются:
А) приливы жара, повышенная потливость
В) полидипсия
С) сердцебиение, кардиалгия
Д) раздражительность, сонливость, депрессия
Е) диспареуния

9. Характерные клинические проявления постменопаузального остеопороза:
А) боль в поясничной области и крестце, усиливающаяся при ходьбе и физической нагрузке
В) нарушение походки
С) сутулость
Д) деформация тазобедренных и коленных суставов
Е) снижение роста

10. Метаболический синдром (х – синдром) характеризуется:
А) снижением толерантности к глюкозе
В) дислипидемией
С) гипертензией
Д) абдоминально-висцеральным типом ожирения
Е) гиноидным типом ожирения

Ответы к тестам
акушерство
1 В
2 Д
3 Е
4 С
5 А
6 Е
7 С
8 Е
9 Е
10 А
11 Е
12 С
гинекология
1 Е
2 С
3 В
4 А,В,С,Д,Е
5 В,Д,Е
6 А,В,Д
7 А,В,Д,Е
8 А,С,Д,Е
9 А,В,С,Е
10 А,В,С,Д

В родильное отделение ЦРБ поступила повторнородящая С., 29 лет, с доношенной беременностью и регулярной родовой деятельностью. В анамнезе 2 медицинских аборта — FINDOUT.SU

Эталон ответа:

1. В данной ситуации имеются симптомы гипотонического кровотечения в раннем послеродовом периоде, которое возникло на фоне отягощенного акушерского анамнеза и родов крупным плодом.

2. Состояние родильницы удовлетворительное.

3. Целью действий акушерки в данной ситуации является сохранение жизни родильницы. Для этого она должна начать оказание неотложной помощи, а именно:

· успокоить родильницу, вселить уверенность в благоприятный исход;

· вызвать врача акушера-гинеколога;

· произвести наружный массаж матки через переднюю брюшную стенку;

· положить пузырь со льдом;

· проводить контроль за общим состоянием, АД, пульсом;

· ввести внутривенно утеротонические средства;

· подготовить к операции ручного контроля полости матки;

· при продолжающемся кровотечении произвести прижатие брюшной аорты и наложить клеммы по Бакшееву.

4. Алгоритм выполнения манипуляции.

В родильное отделение ЦРБ 5 мая доставлена беременная Б., 28 лет, с жалобами на кровянистые выделения

1. Состояние женщины удовлетворительное.

2. Диагноз: беременность 37 –38 недель. Подозрение на предлежание плаценты. Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез.

Обоснование диагноза: исходя из условий задачи, 5 мая срок беременности по последней менструации 38 недель, по I шевелению плода – 37 недель, чему соответствует ОЖ и ВДМ. Появление кровянистых выделений из половых путей во второй половине беременности среди полного здоровья, отсутствие боли в животе, высокое стояние предлежащей части плода, выслушивание шума маточных сосудов в нижних отделах матки, отягощенный акушерский анамнез абортами с повторным выскабливанием позволяют предположить наличие предлежания плаценты. При осмотре половых органов с помощью зеркал исключены другие кровотечения.

3. Учитывая подозрение на предлежание плаценты, имеющуюся кровопотерю около 100 мл, необходимо:

· срочно вызвать акушера;

· до прихода врача успокоить беременную;

· создать строгий постельный режим;

· положить контрольную подкладную;

· установить контакт с веной и начать инфузионную терапию;

· перевести женщину в операционную, где может быть решен вопрос об операции кесарево сечение

· готовиться к операции; вести наблюдение за состоянием беременной.

3. Алгоритм выполнении манипуляции .

 

В роддом 10 сентября доставлена беременная Р. 32 лет с жалобами на резкие локальные боли в животе

Эталоны ответов

1. Действительные проблемы:

· резкие локальные боли в животе, внезапно возникшие;

· кровянистые выделения из половых путей;

· чувство страха;

· беспокойство за состояние плода;

· беспокойство за исход родов.

Потенциальные проблемы:

· риск внутриутробной гибели плода;

· риск развития геморрагического и болевого шока;

· риск возникновения матки Кувелера;

· риск развития эмболии околоплодными водами и ДВС-синдрома.

2. Состояние беременной средней тяжести. Диагноз: беременность 38 недель. Преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты, начавшаяся внутриутробная гипоксия плода. Гипертоническая болезнь I и II А ст., отягощенный акушерский анамнез (ОАА).

Обоснование диагноза: исходя из условий задачи, на 10 сентября срок беременности по последней менструации, окружности живота – 96 см, ВДМ – 38 см соответствует 38 неделям беременности. Появление внезапных локальных болей в животе на фоне гипертонической болезни, отягощенного акушерского анамнеза, несоответствия величины наружного кровотечения тяжести общего состояния, напряжение матки и болезненность ее при пальпации, затруднение определения частей плода из-за повышенного тонуса матки, нарушение сердцебиение плода – тахикардия до 150 ударов в минуту и глухость тонов, свидетельствуют о преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты, начавшейся внутриутробной гипоксии плода.

3. Учитывая состояние беременной, обусловленное преждевременной отслойкой нормально расположенной плаценты, необходимо:

· срочно вызвать врача-акушера, операционную бригаду, неонатолога;

· до прибытия врача успокоить беременную; создать постельный режим;

· подготовить вену и начать инфузионную терапию;

· готовить к операции.

4. Рассказать о преждевременной отслойке и методах профилактики и лечения.

5. Алгоритм выполнения манипуляции.

 

Российской федерации

и социального развития РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Государственное образовательное учреждение

«Всероссийский учебно-научно-методический центр

по непрерывному медицинскому и фармацевтическому образованию»

Базовый уровень среднего профессионального образования

и социального развития РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Государственное образовательное учреждение

«Всероссийский учебно-научно-методический центр

по непрерывному медицинскому и фармацевтическому образованию»

Базовый уровень среднего профессионального образования


Проблемно-ситуационные задачи по акушерству 5

Задачи по оказанию доврачебной помощи при неотложных состояниях 59

1. Выявить проблемы пациента. 79

2. Определить цели ухода. 79

3. Определить главную проблему. 79

4. Составить план действий акушерки по основной проблеме. 79

5. Дать основные рекомендации по уходу. 79

Цели ухода: 79

Краткосрочная цель – уменьшение болезненности и гематомы. 79

План действий медсестры: 79

Проблема – болезненность в области ключицы и беспокойство. 79

Цель – уменьшение болезненности и беспокойства. 79

Действия медсестры: 79

1. Направление на консультацию к неонатологу, невропатологу, ортопеду. 79

2. Организация правильного ухода и вскармливания. 79

3. Основные рекомендации по уходу: 79

– бережный уход и пеленание с использованием ортопедической укладки, 79

– вскармливание грудным молоком из рожка до улучшения состояния, 79

– выполнение назначений врача, 79

– бережная транспортировка ребенка (на руках) на физиотерапевтические процедуры и массаж, на обследование, 79

– раздача лекарственных препаратов, 79

1. Выявить проблемы пациента. 79

2. Определить главную проблему. 79

3. Определить краткосрочную и долгосрочную цели. 79

4. Составить план действий м/с по основной проблеме. 79

5. Дать основные советы матери по уходу и вскармливанию. 79

Цели: 80

– краткосрочная – уменьшение в размере родовой опухоли, 80

План действий м/с: 80

– консультация неонатолога, 80

– выполнение назначений врача, 80

– бережное пеленание и уход, 80

– холод к голове, 80

– кормление из рожка сцеженным грудным молоком, 80

– раздача лекарственных препаратов (фенобарбитал, валериана, пустырник, вит. К и т.д.), 80

Советы матери по уходу: 80

– обучить правилам подмывания, обработки кожи и слизистых, 80

– обучить технике пеленания, 80

– обучить технике сцеживания молока, обработке груди, сосков, 80

– обучить технике обработки рожков и сосок, 80

Критерий оценки достигнутого результата: уменьшение размеров опухоли, появление хорошего сосательного рефлекса, уменьшение утомляемости при сосании, исчезновение беспокойства. 80

Клинические задачи по хирургии 85

Осложнения анестезии – причина материнской смертности в крае за 13 лет (1989-2001 гг. ) – тема научной статьи по клинической медицине читайте бесплатно текст научно-исследовательской работы в электронной библиотеке КиберЛенинка

© ЕГОРОВА А.Т. –

УДК 616-009.614-06:618.3-036.88(571.51)

ОСЛОЖНЕНИЯ АНЕСТЕЗИИ – ПРИЧИНА МАТЕРИНСКОЙ СМЕРТНОСТИ В КРАЕ ЗА 13 ЛЕТ (1989-2001 гг.)

Л. Т. Егорова.

(Красноярская государственная медицинская академия, ректор – акад. АН ВШ д.м.н., проф. В.Н. Про-хоренков; кафедра акушерства и гинекологии ФПК и ППс, зав. – проф. А.Т. Егорова)

Резюме. Представлены результаты экспертного анализа материнской смертности при анестезиологических осложнениях у беременных и рожениц за 13 лет по Красноярскому краю. Недооценка операционно-анестезиологического риска, исходного функционального состояния беременных, тяжесть акушерской и экстрагенитальной патологии, ошибочно выбранный вариант анестезии являются основными причинами материнской смертности. Доля умерших от этих осложнений по нашим исследованиям составила 2%.

Мировая статистика по материнской смертности свидетельствует, что смерть 50 тыс. женщин происходит вследствие медицинских ошибок (В.Е. Радзинский, 1997). Оснащение медицинских учреждений современной лечебно-диагностической аппаратурой и средствами интенсивной терапии, развитие и усовершенствование эндоскопии и наркозной аппаратуры, постоянное обновление и увеличение ассортимента апалгетиков и других фармакологических средств, с одной стороны, значительно расширило возможности диагностики и лечения, а с другой, увеличило нежелательные последствия врачебных действий, порождающих ятрогеппые причины смерти.

Расширение показаний к операции кесарева сечсиия преследует цель существенно снизить показатели материнской и перинатальной смертности (В.И. Кулаков, Е.А. Чернуха, 1ГМ Комисаро-ва, 1998). Вместе с тем увеличивается число осложнений, связанных с анестезией. Основные причины кроются в особенностях организма беременных, акушерской и перинатальной патологии, функционального состояния сердечно-сосудистой системы, газообмена, гомеостаза, в выборе метода анестезии и уровня хирургической техники оператора (В.И. Кулаков, И.В. Прошила, 1994). Нежелательное угнетающее действие большинства анестетиков на плод, новорожденного и сократительную функцию матки заставляет анестезиолога максимально редуцировать их дозу, получаемую роженицей до момента извлечения плода. Недостаточное анестезиологическое прикрытие в момент хирургической агрессии может привести к нарушениям жизненно важных функций органов и систем в организме беременных, особенно в группе акушсрско-перинаталыюго риска и экстрагенитальной патологии.

Наиболее часто встречаются следующие осложнения:

• синдром компрессии нижней полой вены;

• связанные с катетеризацией магистральных сосудов;

• трудные и неудачные интубации;

• регургитация и аспирация желудочным содержимым;

• побочные реакции на лекарственные вещества.

Цель исследования: изучить причины анестезиологических осложнений, степень операционноанестезиологического риска, тяжесть акушерской и экстрагенитальной патологии. Определить объем и адекватность оказания медицинской помощи при возникновении критического состояния у беременной и роженицы и возможность предотвращения летального исхода.

Материалы и методы Проведен был ретроспективный клииико-ста-тистичсский анализ первичной медицинской документации 296 женщин, из которых 6 (2%) погибли от анестезиологических осложнений. Проведен экспертный анализ организационных, тактических и клинических ошибок медицинского персонала при оказании ургептпой помощи.

Результаты и обсуждение Изучение медико-социальных характеристик женщин показало, что в возрастной структуре случаев материнской смертности (МС) от анестезиологических осложнений преобладали молодые женщины 18-23 лет -две трети (4), а в 27-31 – одна треть. Городские жительницы составили 66,7% (4), сельские – одна треть (2).

Соматическая патология была отмечена у 2 женщин: одна страдала ожирением III степени, другая – хроническим пиелонефритом. Первобеременные женщины составили две трети (4), повторнородящие – одна треть (2).

Анализ качества диспансерного наблюдения в женской консультации показал, что всс женщины встали на учет по беременности в сроке 12-14 недель. Несмотря на своевременность взятия на учет при наблюдении за беременными допускались ошибки: неполный объем обследования, при наличии отеков, гипертензии беременные не осмотрены окулистом, терапевтом, поэтому диагноз гестоза не поставлен и своевременная госпитализация не осуществлялась. При наличии крупного плода у беременной и сочетанного позднего гестоза допускалось персиашиванис на 2-3 недели. Беременная с рубцом на матке после операции кесарева сечения была доставлена в родильный дом с доношенной беременностью и начавшейся родо-

вой деятельностью. Анализ течения беременности свидетельствует о том, что у всех женщин наблюдался поздний гестоз средней степени тяжести, который врачами женской консультации не был диагностирован.

Течение родового акта. В 5 случаях (83,3%) наблюдались срочные роды и в 1 (16,7%) – запоздалые в сроке 42-43 недели. Родоразрешены операцией кесарева сечения в экстренном порядке 5 (83,3%>) женщинам, а одна – умерла неродоразре-шенной. Показаниями к операции кесарева сечения являлись:

• запоздалые роды в 42-43 недели, крупный плод, гестоз средней степени тяжести;

• срочные роды у женщины с рубцом па матке, гипоксия плода, гестоз;

• срочные роды, дискоординация родовой деятельности, рубцовая деформация шейки матки;

• преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты при доношенной беременности вследствие анафилактического шока на введения раствора диссоля;

• общеравпомсрносуженпый таз I ст. у первородящей в 27 лет.

Проведенная нами экспертная оценка случаев МС позволила установить следующие ошибки, которые допускались врачами акушерами-гинекологами при ведении рожениц:

• запоздалая госпитализация беременных в стационар;

• неадекватный выбор времени родоразрешения при осложненном течении беременности и родов;

• недооценка тяжести состояния рожениц, запоздалое оперативное вмешательство при оказании помощи роженицам в критическом состоянии.

Для проведения ипфузиоипо-трансфузионной терапии при возникновении кровотечения необходимо пунктировать и катетеризировать крупные периферические вены, а при невозможности – катетеризацию магистральных вен, чаще подключичной. При катетеризации подключичной вены наблюдались следующие осложнения: пункция

артерии с развитием гсмопнсвмоторакса, пневмоторакс, гидропнсвмоторакс. Каждое из этих осложнений может быть причиной смерти больных. Большая вероятность неудач и осложнений при катетеризации центральных вей у беременных связана с ограничением времени в связи с экстренностью операций, поджатием верхушки легких увеличенной маткой, невозможностью создания оптимального положения для пункции. В таких условиях пункция и катетеризация яремной вены более предпочтительна из-за меньшего количества осложнений (Л.П. Зильбер, 1984).

Основными причинами МС в исследуемой группе от ансстсзиолого-рсанимациопных осложнений являлись: аспирационный синдром у половины (3), побочное действие на лекарственное вещество – у 1 (16,7%), неудачные катетеризация подключичной вены и интубацией – по 1 (16,7%).

Возникновению аспирационных осложнений в акушерстве способствуют многие специфические факторы, например, особенности водного баланса беременных женщин, делающие их легкие более уязвимыми по сравнению с легкими псберемен-ных женщин (Brock-Utue J.G., Dowwing J.W., Di-mopoulos G.E. et al., 1980). Помимо этого, при беременности (влияние прогестерона) замедлен пассаж пищи по пищеварительному тракту, повышена кислотность желудочного сока, и посему возникновение регургитации у них облегчено. В III триместре в 80% случаев среди беременных регистрируются гастроэзофагеальный рефлюкс. Этим осложнениям могут способствовать подъем диафрагмы, увеличение впутрибрюшного давления и вызываемая этим компрессия желудка (Л.И. Воробьев и соавт., 2001).

Летальность при акушерском аспирациопном синдроме очень высока, причем среди смертельных осложнений акушерской анестезии аспирационный синдром занимает первое место (Varner R.G., Goodman N.W., 1989). Все это позволяет относить в группу риска женщин с крупным плодом, переношенной беременностью, мпоговодисм, многоплодием и, конечно же, тех, кому предстоит экстренное оперативное родоразрешение.

Аспирация опасна не столько механическим препятствием дыханию, сколько немедленными рефлекторными реакциями и последующим пнев-мопитом. Первичная реакция на кислое желудочное содержимое в легких – это ларинго- и брон-хиолоспазм, а также брадикардия, вплоть до остановки сердца, которые возникают как вагальный рсфлскс па раздражение дыхательных путей. Эти симптомы требуют немедленной реакции анестезиолога – применение атропина, алупепта, миоре-лаксантов и ИВЛ, которые сравнительно быстро нормализуют дыхание. После этого может наблюдаться короткий бессимптомный период, а затем начинается характерная клиника гиперэргическо-го ппевмопита, который является типичным вариантом синдрома острого легочного повреждения (СОЛИ).

Первое клиническое наблюдение. Поступила роженица З.Н.Г., 21 года, жительница города. Беременность была вторая, а предстоящие роды – 1. Диагноз при поступлении: запоздалые роды в 4243 недели, крупный плод, поздний гестоз, ожирение III степени. Через 6 часов от начала родовой деятельности выявлен клинически узкий таз, возникла гипоксия плода. В экстренном порядке решено было ее родоразрешить путем операции кесарева сечения. Во время проведения наркоза произошла аспирация желудочным содержимым и остановка сердца. Проводимые реанимационные мероприятия привели к ранению прикорневой зоны левого легкого, и кровотечению в левую плевральную полость (1500 мл), ранению передней стенки правого желудочка сердца, что и явилось причиной смерти. Анализируя данное наблюдение, выявлены существенные недостатки в оказании медицинской помощи па всех этапах: в жен-

екой консультации, допустили псрснашивание, не диагностировали поздний гсстоз; в родильном доме – абдоминальное родоразрешение выполнено с опозданием на 6 часов. Реанимационные мероприятия, проводимые у тучной женщины, привели к тяжелой травме, несовместимой с жизнью.

Предрасполагающими моментами регургита-ции с развитием кислотно-аспирационного пнев-монита является экстренность анестезии, длительная задержка пищи в желудке из-за сниженной его моторики, повышение желудочной секреции. Проведение поверхностного наркоза независимо от применяемого анестетика всегда чревато развитием рвоты, а его углубление и применение миорелаксантов – опасностью регургитации и аспирации (Н.Н. Растригип, 1978).

Второе клиническое наблюдение. Беременная Б.Г.Л., 23 года, жительница города. Беременность четвертая, предстоящие роды – 2. Показанием к операции явились: беременность 39-40 недель,

крупный плод, рубцовая деформация шейки матки, слабость родовой деятельности. При проведении анестезиологического пособия произошла массивная аспирация желудочным содержимым, наступила асфиксия и остановка сердца. Проводимые реанимационные мероприятия эффекта не дали. Женщина погибла на операционном столе неродоразрешенной. Патологоапатомический диагноз: аспирация желудочным содержимым, асфиксия, мелкоточечпые кровоизлияния под плевру, наличие в бронхах желудочного содержимого. Непосредственной причиной смерти явилась по-станоксичсская энцефалопатия.

Приведенные данные свидетельствуют об однотипности дефектов в оказании медицинской помощи беременным, а именно: запоздалая госпитализация, родоразрешение в экстренном порядке, низкая квалификация врача-анестезиолога, неоправданная поспешность при родоразрешепии у неподготовленных к наркозу беременных или рожениц.

Третье наблюдение. Роженица Р.И.В., 27 лет. Показанием к операции кесарева ссчсния явилось анатомическое сужение таза I степени, дородовое излитис околоплодных вод. Родовой деятельности не было. За 1 час до излития околоплодных вод беременная хорошо покушала. Проводилось промывание желудка с целью подготовки к операции. Анестезиологическое пособие оказывал врач анестезиолог из общей лечебной сети. Во время проведения наркоза развился аспирациопный синдром, асфиксия, остановка сердца и женщина погибает на операционном столе неродоразрешенной. Причиной смерти явилась аноксическая энцефалопатия, дистрофические и некробиотиче-ские изменения в органах.

К другим осложнениям наркоза относятся трудные и неудачные попытки интубации трахеи. Наиболее частой причиной смерти является гипоксия с последующей остановкой сердца. На случай трудной или неудачной интубации должен быть заранее заготовлен план действия анестезио-

лога. При возможности хотя бы временно отсрочить операцию следует проводить масочную вентиляцию легких до полного восстановления дыхания и сознания. В последующем возможно выполнение регионарной анестезии или проведение масочно-внутривенного наркоза. Тактика – во чтобы то ни стало, интубировать больную – порочна и чревата опасными осложнениями.

Четвертое наблюдение. Роженица, Б.Л.К., 31 года, жительница города. Беременность шестая, предстоящие роды – 3. В анамнезе операция кесарева сечения. Поступает в родильный дом при сроке беременности 39-40 недель с ранним изли-тисм околоплодных вод и родовой деятельностью. В экстренном порядке проводится операция кесарева сечения по поводу гипоксии плода и рубца на матке. При неоднократной попытке интубации у роженицы наступила асфиксия и остановка сердца. Проводимые реанимационные мероприятия эффекта ис дали. При анализе смерти данного случая выявлены организационные и тактические ошибки (постоянно повторяющиеся). Беременной с рубцом па матке была показана госпитализация в родильный дом в сроке 36-37 недель и абдоминальное родоразрешение в плановом порядке.

Катетеризация центральных вен связана со значительным риском осложнений, знание которых необходимо для их раннего выявления, лечения и профилактики (Г.Л. Рябов, 1994). Осложнения возникают в 4,8-23,0% всех случаев катетеризации. Часть из них, такие как пункция артерии, пневмоторакс, воздушная эмболия зависят от опыта и квалификации врача и могут быть сведены к минимуму углублением знаний по анатомии и адекватным профессиональным обучением (Л.П. Зильбер, 1984). При катетеризации центральных вен у больных с острой массивной кро-вопотерей, сопровождающейся ДВС-сипдромом в фазе гипокагуляции, необходимо соблюдать ряд правил, позволяющих эффективно предупреждать тяжелые геморрагические осложнения. До нормализации гемостаза катетеризируют периферическую вену и через нес проводят трансфузию необходимых компонентов крови. Только после коррекции гемостаза можно безопасно катетеризировать подключичные или внутренние яремные вены (Л.И. Воробьев и соавт., 2001).

Примером низкой квалификации врача анестезиолога может служить следующее пятое наблюдение.

Роженица 11.0.11., 18 лет, жительница города. Срочные роды через естественные родовые пути живым ребенком, осложнились в раннем послеродовом периоде гипотоническим кровотечением, проведено ручное обследование полости матки, массаж матки, клеммы по Бакшееву, введены уте-ротонические препараты. Матка сократилась. Кровопотеря составила 1500 мл. Проводилась ин-фузионпо-трансфузионпая терапия через периферическую вену (гемодинамика стабильная, ЛД 90/60 и 100/70 мм рт ст, пульс 100 уд/мин). Для дальнейшего проведения инфузиопной терапии

анестезиолог проводит неоднократные попытки катетеризации подключичных вен справа и слева (девятикратная попытка). Состояние родильницы резко ухудшилось, возникла острая сердечнососудистая недостаточность и через 40 минут она умирает. Патологоанатомический диагноз: перфорация стенок подключичной артерии и вены, куполов плевры справа и слева. Осложнения: кровотечения в левую плевральную полость(4000 мл)и в правую (450 мл), что и явилось непосредственной причиной смерти.

Пирогенная реакция. Бактериальный шок, возникший в результате инфузии лекарственных препаратов, наблюдался у шестой женщины.

Щ.И.И., 19 лет. У первобеременной (39-40 недель) с легким гестозом на введение 150 мл дис-соля начался потрясающий озноб, повышение температуры до 40°С, цианоз, падение АД до 50/00 мм. рт. ст. На этом фоне произошла преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты, родоразрешена операцией кесарева сечения с последующей экстирпацией матки (матка Кювелера) – кровопотеря 4900 мл. Проводилась массивная инфузионо-трансфузиоппая терапия

(перелито 13 000 мл крови). Смерть наступила на 3 сутки от полиорганной недостаточности.

Все изложенное доказывает, что недооценка операционно-анестсзиологического риска, исходного функционального состояния беременных, тяжести акушерской и экстрагенитальной патологии, ошибочно выбранный вариант анестезии, неадекватная коррекция волемических нарушений, ранний перевод больных на самостоятельное дыхание при тяжелой патологии, недостаточная квалификация врача-анестезиолога создают условия для возникновения серьезных осложнений как во время операции, так и в раннем послеоперационном периоде.

Снижению материнской смертности будут способствовать введение стандартов алгоритма ведения беременных, рожениц и родильниц с различной акушерской патологией. Повышение квалификации врачей акушеров-гинекологов и ане-стезиологов-реаниматологов, правильная и четкая организация акушерской анестезиолого-реапима-ционпой служб являются важным фактором в предотвращении материнской смертности.

COMPLICATION OF ANESTHESIA -THE CAUSE OF MATERNAL MORTALITY IN THE REGION DURING 13 YEARS ( 1989-2001 YEARS)

A.T. Egorova (Krasnojarsk State Medical University)

Presented are the results of expert analysis of maternal motality caused by ancsthesiological complications in pregnant women and women in labor during 13 years in Krasnojarsk Region. Underestimation of surgical and ancsthesiological risks, initial functional state of pregnant women, the severity of obstetrical and extragenital pathology, wrong variant of anesthesia are the main cause of maternal mortality. The share of women, who died of these complications, according to our investigation, amounted to 2 per cent.

Литература

1. Воробьев А.И., Городецкий В.М., Шулутко Е.М., Васильев С.А. Острая массивная кровопотеря. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001 .-1 76 с.

2. Зильбер АЛ. Клиническая физиология в анестезиологии и реаниматологии. – М.: Медицина, 1984. -470 с.

3. Кулаков В.И., Чернуха Е.А., Комисарова Л.М. Кесарево сечение. – М.: Медицина, 1998. – 192 с.

4. Кулаков В.И., Прошипа И.В. Экстренное родораз-решение. – М.: Медицина, 1994. – 272 с.

5. Радзинский В.Е. Материнская смертность в современном мире (по материалам 1 Всемирного конгресса по проблемам материнской смертности, Марокко,

8-14 марта, 1997) // Вести. Рос. ассоц. акушеров-гинекологов. – 1997. -Х«3. – С.119-122.

6. Растригип Н.Н. Анестезия и реанимация в акушерстве и гинекологии. – М.: Медицина, 1978. – 186 с.

7. Рябов Г.А. Синдромы критических состояний. – М.: Медицина, 1994. – 336 с.

8. Brock-Utue Dowwing Dimopoulos G.E. et

al. Effect of domperidon on lower esophageal sphincter tone in late pregnancy // Anesthesiology. – 1980. -Vol.52, N.4. – P.321-323.

9. Vamer R.G., Goodman N.W. Gastro-oesophageal reflex in pregnancy at term and after delivery // Anaesthesia. – 1989. – Vol.44. – P.808-81 7.

© НИКОЛАЕВА С.В. -УДК 616.24.-002.5+.2/.3+616.15

КАРТИНА ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ С ПОБОЧНЫМИ РЕАКЦИЯМИ НА ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫЕ ПРЕПАРАТЫ

С. В. Николаева.

(Иркутский институт усовершенствования врачей, ректор – член-корр. А.А. Дзизинский, кафедра туберкулеза, зав. – проф. Т.П. Маслаускене)

РАМН, д.м.н., проф.

Резюме. Клиническая форма туберкулеза легких и характер течения туберкулезного процесса вызывают разную реакцию лейкоцитарной и эритроцитарной систем крови. Целью исследова-

(PDF) Когерентное рассеяние в малой квантовой точке

590

JETP LETTERS Vol. 80 № 9 2004

ТКАЧЕНКО и др.

вырождены, как в идеальном треугольнике [13]. Дублетное

расщепление колебаний может быть вызвано асимметрией системы.

В наших измерениях температурная зависимость

амплитуды колебаний не слишком сильная в диапазоне

0,04–1,5 К (рис. 1а, 1б), что обусловлено малым размером

точки (100 нм) .Таким образом, можно сделать вывод, что

уровней энергии, проявляющихся в осцилляциях, разнесены

более чем на 0,1 мэВ. Этот вывод согласуется с расчетом числа электронов (20–25)

[8] и глубины потенциальной ямы (5–6 мэВ) в квантовой точке при Vg = 0,

.

Согласно как косвенным экспериментальным данным

, опубликованным в [14], так и расчетам магнитотранспорта

[15] в малых кольцевых интерферометрах, наличие даже

слабого магнитного поля (B = 0.5 Т) как подавляет обратное

рассеяние, возникающее в контактах между входным

каналом с кольцом, так и улучшает квантование проводимости

. Иными словами, пики сопротивления

структур в отсутствие магнитного поля

соответствуют состояниям с отрицательным магнитосопротивлением в

слабых магнитных полях [15]. Этот факт качественно

согласуется с нашими измерениями (рис. 1б, 1в).

видно, что поле B = 0.4 Тл подавляет колебания в G

и для более низкого плато проводимости 2e2/ч.

Для подтверждения интерференционной природы колебаний проводимости смоделировали электростатику

прибора и когерентного одночастичного магнитотранс-

порта. На рис. 2 показаны результаты.

Рассчитан эффективный потенциал в 2D-газе

с заменой случайного распределения заряда

в дельта-легированных слоях более равномерным

R1213

1–

При этом не учитывается зависимость глубины травления от координаты в пределах области травления.

Антиточки рассматривались как идеально круглые; они имели одинаковый диаметр

, а срезы представляли собой прямоугольники

одинаковой ширины. При этих предположениях квантовая точка по форме близка к правильному треугольнику,

вершин которого соединены узкими контактами с

оставшимся двумерным электронным газом. Реальный эффективный потенциал Uэфф(х, у) не является строго симметричным из-за технологических допусков, а асимметрия прежде всего проявляется

в вариациях проницаемости трех входов в

точку [8, 16].Поэтому для имитации различия

между номинально идентичными приборами расстояния

между центрами антиточек, а также общая

глубина травления варьировались незначительно (в пределах 10 нм).

Электронную проницаемость точки в отсутствие

магнитного поля рассчитывали методом S-матрицы

[6, 9, 15, 17]. Проводимость определяли по

многоканальной формуле Ландауэра. Влияние магнитного поля

на прохождение электрона учитывалось

рекуррентными функциями Грина [18].Для простоты предполагалось, что форма эффективного электростатического потенциала

не зависит от энергии

падающей частицы EF.

Согласно транспортным расчетам модель

исследуемой треугольной квантовой точки

обеспечивает глубокие провалы проводимости на фоне плато

, близком к 2e2/h. Зная величину EF – Ueff(x, y)

, мы нашли, что характерное расстояние между

провалами проводимости, ∆EF, соответствует изменению

числа электронов в квантовой точке примерно на

десятых .Таким образом, расстояние между провалами проводимости

, измеренное с использованием значения, полученного для Cg, согласуется

со значением теории переноса. В целом картина

колебаний аналогична полученной в измерениях

(рис. 1). Качественно воспроизводится различие форм колебаний

для двух разных состояний точки.

Для случая 2, где точка менее открыта и симметрична,

выражено дублетное расщепление пиков проводимости при нулевой

температуре в отсутствие магнитного поля.При этом величина расщепления соответствует

изменению числа электронов в точке на два или

на три; т. е. это рассеяние на паре уровней между

и

, на которых отсутствуют другие квазидискретные состояния.

Расчетная реакция проводимости

трехконцевых точек как на повышение температуры

, так и на появление магнитного поля качественно

аналогична измеренной реакции и G на

изменения Т и Б.Однако при B = 0,4 Тл на линии проводимости 2e2/h, рассчитанной для состояния 2

, остаются узкие провалы

. В измерениях эти провалы отсутствуют. Для

этого состояния и при B = 0 провалы более выражены

, чем наблюдаемые при измерениях. Однако

они становятся заметно менее выраженными, когда одна антиточка

отдаляется от двух других всего на 10 нм (состояние 1).

Следовательно, реальные различия в ширине входов в

точка могут быть причиной уменьшения амплитуды2. Полная проводимость квантовой точки в зависимости от энергии Ферми

для немного различающихся профилей потенциала 1 и 2 (линии 2

соответствуют менее открытой и более асимметричной точке).

прямых для случая 1 (B = 0) смещены по оси ординат на

2e2/h. Около линий указаны температуры, соответствующие усреднению кондактанса

по энергиям частиц и магнитным полям

В (T = 0 для случая 2).

(2e2/h)

EF

Произошла ошибка при настройке файла cookie пользователя

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Активин А и Ингибин А по-разному регулируют металлопротеиназы матрикса матки человека: потенциальные взаимодействия во время децидуализации и инвазии трофобласта | Эндокринология

Эмбриональная имплантация и инвазия трофобласта являются жестко регулируемыми процессами, включающими сложную связь между материнскими децидуальными и эмбриональными клетками трофобласта.Децидуализация является предпосылкой для успешной имплантации, и ей способствует ряд паракринных агентов, включая активин А. Чтобы понять последующие механизмы децидуализации, стимулируемой активином, было исследовано влияние активина на матриксные металлопротеиназы (ММП) (важные медиаторы децидуализации). . Активин А стимулировал выработку эндометрием проММП-2, -3, -7, -9 и активной ММП-2. Напротив, ингибин А был мощным ингибитором проММР-2 и противодействовал эффекту активина на ММР.Активин активируется при децидуализации, а MMP-2, -3 и -9 увеличиваются параллельно. Кроме того, продукция проММП-2 стимулируется, когда децидуализация ускоряется активином, и подавляется, когда активин нейтрализуется, ослабляя децидуализацию. Эти данные подтверждают, что активин А способствует децидуализации посредством повышающей регуляции MMP. Предыдущие данные in vitro предполагают дальнейшую роль активина и ММР в продвижении инвазии трофобласта; поэтому мы исследовали их взаимосвязь в местах ранней имплантации человека.MMP-7 и -9 продуцировались статическими субпопуляциями цитотрофобластов, тогда как MMP-2 поразительно активировалась в инвазивных вневорсинчатых цитотрофобластах (EVT). Материнская децидуальная оболочка является основным источником активина, роль которого в стимуляции MMP-2 в iEVT можно предположить. Ингибин отсутствовал в популяциях цитотрофобластов, за исключением резкого повышения активности в эндоваскулярных пробках EVT, совпадающего с подавлением MMP-2. Это предполагает, что ингибин может играть роль в прекращении сосудистой инвазии.Эти данные подтверждают, что активин посредством воздействия на MMPs является важным фактором в диалоге между матерью и плодом, регулирующим имплантацию.

УСПЕШНАЯ ИМПЛАНТАЦИЯ имеет решающее значение для наступления беременности. Неудачная имплантация эмбриона, ведущая причина неудачи оплодотворения in vitro , обычно связана с дефектами эндометрия (1), тогда как самопроизвольный аборт, задержка внутриутробного развития и преэклампсия являются возможными последствиями субоптимальной инвазии трофобласта. Понимание местной регуляции подготовки эндометрия к имплантации и инвазии трофобласта имеет решающее значение для разработки новых стратегий мониторинга и лечения патологий, возникающих на ранних сроках беременности.

Инвазия человеческого трофобласта очень агрессивна, и эндометрий подвергается тщательной подготовке в ожидании имплантации. В частности, строма эндометрия спонтанно дифференцируется в каждом цикле с образованием децидуальной оболочки. Ряд паракринных факторов способствует децидуализации, включая ИЛ-11 и кортикостероид-рилизинг-гормон (2, 3). Более ранние исследования в нашей лаборатории показали, что активин А (член суперсемейства TGF-β) также ускоряет децидуализацию и что децидуальные клетки секретируют высокие концентрации активина А (4).

Важнейшим элементом децидуализации является ремоделирование внеклеточной среды. Активность матричной металлопротеиназы (ММР) важна во время децидуализации: ингибирование ММР на ранних сроках беременности у крыс приводит к сильному уменьшению децидуальной оболочки (5, 6) и ограничивает децидуализацию стромальных клеток приматов в культуре (7). Помимо расщепления компонентов внеклеточного матрикса (ECM), MMPs играют более широкую роль в процессинге и высвобождении связанных с ECM факторов роста, необходимых для ремоделирования тканей (8).TGFβs являются важными ингибиторами MMPs эндометрия, передающими супрессивные эффекты прогестерона (9). Кроме того, активин А способствует продукции ММП-2 в моноцитах и ​​плаценте (10, 11). Поэтому мы предположили, что активин стимулирует продукцию ММП в клетках эндометрия человека, обеспечивая потенциальный нижестоящий механизм, посредством которого активин способствует децидуализации.

Децидуальный активин А также может регулировать инвазию трофобласта посредством воздействия на ММП цитотрофобласта. Инвазивные вневорсинчатые цитотрофобласты (EVT) дифференцируются из цитотрофобластов-предшественников в якорных столбцах клеток при контакте с материнской децидуальной оболочкой.Они либо проникают в децидуальную оболочку как интерстициальные (i) EVT, либо специфически нацелены и проникают в материнские артерии как эндоваскулярные (v) EVT. Они образуют агрегаты, закупоривающие и впоследствии реконструирующие материнские сосуды (12). Фокальное переваривание децидуального внеклеточного матрикса с помощью iEVTs имеет решающее значение для их инвазии, а клетки цитотрофобласта секретируют протеазы, разрушающие матрикс (13). Факторы, секретируемые децидуальными клетками, сильно стимулируют продукцию ММР цитотрофобластами, повышая уровень ММР-9 и -2 на 200 и 600% соответственно (14).В то время как активные компоненты не были идентифицированы, отдельное исследование показало, что активин А стимулирует секрецию ММП-2 цитотрофобластами и способствует росту цитотрофобластов из кончиков ворсинок плаценты в модели инвазии трофобласта (10). Поскольку децидуальные клетки секретируют высокие уровни активина А (4), мы предполагаем, что активин материнского происхождения в значительной степени способствует инвазии трофобласта.

В текущем исследовании изучались взаимодействия между активинами и ММР во время наступления беременности у человека — как в децидуальной оболочке матери во время подготовки к имплантации, так и при последующей инвазии децидуальной оболочки клетками трофобласта плода.Эффекты активина А на продукцию ММП эндометрия в присутствии и в отсутствие антагонистов ингибина и фоллистатина продемонстрированы и подтверждены коэкспрессией активина и ММП во время децидуализации. Более того, обработка активином и блокада во время децидуализации in vitro оказывает последующее воздействие на продукцию ММР. Наконец, были исследованы взаимосвязи между активином, ингибином и ММП в децидуальной оболочке и отдельными субпопуляциями трофобластов в местах ранней имплантации человека.

Материалы и методы

Салфетки

Биоптаты эндометрия из пролиферативной (d5–13; n = 5) и секреторной (d15–14; n = 5) фаз были взяты путем выскабливания у женщин (возраст 25–40 лет), прошедших незначительные гинекологические исследования, не связанные с патологией эндометрия. Образцы собирали в смеси 1:1 DMEM и среды Хэма F12 (DMEM/F12; Trace Biosciences, Сидней, Австралия) с добавлением 1% пенициллина, стрептомицина и фунгизона (Commonwealth Serum Laboratories, Мельбурн, Австралия) и L-глутамина. (Сигма Диагностика, ул.Луи, Миссури). Места имплантации в первом триместре (n = 6) были собраны после хирургического прерывания беременности (6–8-недельная аменорея), зафиксированы в 10% забуференном формалине и залиты парафином. От пациентов было получено письменное информированное согласие, а этическое одобрение было получено от институциональных комитетов по этике.

Выделение клеток

Клетки эндометрия были выделены из отдельных биопсий, что дало препараты стромальных и эпителиальных клеток (n = 10) для последующего гормонального лечения.Эндометриальную ткань подвергали ферментативному расщеплению, и после разделения путем фильтрации (4, 15) фракции, обогащенные стромальными и эпителиальными клетками, высевали на ночь в среду DMEM/F12 с 10% очищенной углем фетальной телячьей сыворотки (Trace Biosciences), 1% пенициллина, стрептомицина. , и фунгизон, и л-глютамин.

Клетки дополнительно очищали путем селективного прилипания: стромальные клетки отделяли трипсином, высевали в 24-луночные планшеты и промывали через 45 мин для удаления неприлипших клеток. Эпителиальным клеткам давали вырасти из железистых структур в течение 48 часов, затем отделяли с помощью трипсина и серийно пересевали (три раза) в пластиковые чашки для культивирования в течение 30 минут, чтобы обеспечить прикрепление контаминирующих стромальных клеток.Неадгезивные клетки переносили на 24-луночные планшеты. Этот метод обеспечивает чистоту культур 97–99 % (стромальная) и 85–90 % (эпителиальная) по морфологическим и иммуногистохимическим критериям (15). Клетки выращивали в DMEM/F12/очищенной от угля фетальной телячьей сыворотке в течение 48 ч до 80% конфлюэнтности, затем помещали в бессывороточную среду DMEM/F12 на 24–48 ч перед обработкой. Через 24 часа после обработки среду собирали, центрифугировали и быстро замораживали несколькими аликвотами. Количество клеток и их жизнеспособность оценивали по исключению трипанового синего.

Лечение

Эпителиальные и стромальные клетки обрабатывали в среде DMEM/F12, содержащей: рекомбинантный человеческий (rh) активин A (R&D Systems Inc., Миннеаполис, Миннесота), rh-ингибин A (Diagnostic Systems Laboratories, Webster, TX), rh-фоллистатин-288. (Biotech Australia, Сидней, Австралия) все между 1–4 нм. TGF-β1 (R&D Systems) использовали при длине волны 0,2–2 нм.

Зимография

Желатиновая и казеиновая зимография была проведена для обнаружения и количественной оценки секреции латентных и активных форм ММП клетками эндометрия (16).Кондиционированные среды из клеток почек детенышей хомячков, стабильно трансфицированных человеческой ММР-9 (предоставлены доктором Д. Эдвардсом, Университет Восточной Англии, Норвич, Великобритания), использовали в качестве стандартов для желатиновой зимографии, тогда как очищенные рекомбинантные проММР-1, -3, и -7 использовали для казеиновой зимографии (Chemicon Australia Pty. Ltd., Борония, Виктория, Австралия). Уровни MMP определяли полуколичественно с помощью денситометрического анализа (размер и интенсивность полосы) с использованием Gel Doc (Bio-Rad Laboratories, Regent’s Park, Australia). Анализы проводились до насыщения гелем (поэтому образцы анализировались в диапазоне разбавлений или концентраций), и сравнивались полосы на одном и том же геле.

ИФА

Продукцию пролактина стромальными клетками эндометрия анализировали с помощью ELISA (Bioclone Australia Pty. Ltd., Сидней, Австралия) в качестве меры степени децидуализации (4). Нижний предел обнаружения составил 10 мМЕ/л; меж- и внутритестовая вариабельность составила 6,2% и 3,6%. Активин A и ингибин A измеряли с помощью ELISA (Oxford-Bioinnovation Ltd., Аппер-Хейфорд, Великобритания) (4, 17), используя в качестве стандартов: rhActivin A (Национальный институт биологических стандартов и контроля, Potters Bar, UK) и rhInhibin A. (Лаборатории диагностических систем).Чувствительность ELISA составляла: активин 35 пг/мл с вариабельностью между и внутри анализа 6,8% и 3,1% и ингибин 6 пг/мл с вариабельностью между анализами и внутри анализа менее 10%.

Децидуализация in vitro

Стромальные клетки эндометрия децидуализировали in vitro (4) с цАМФ (0,5 мМ, Sigma) в течение 8 дней или с 17β-эстрадиолом (E; , 10 −7 м, Сигма) в течение 12 сут.Во время индуцированной стероидами децидуализации клетки обрабатывали rh-активином А (0–4 нМ) или фоллистатином-288 (0–3 нМ), эндогенным антагонистом биологической активности активина (18), на протяжении всего эксперимента. Среду собирали каждые 48 часов. Клетки, обработанные цАМФ, быстро замораживали для выделения РНК.

ОТ-ПЦР в реальном времени

Тотальную РНК экстрагировали из клеточных осадков с использованием спин-колонок RNeasy (Qiagen Pty. Ltd., Донкастер, Виктория, Австралия) в соответствии с инструкциями производителя и обрабатывали дезоксирибонуклеазой I, не содержащей рибонуклеазы (Ambion, Остин, Техас).Образцы РНК оценивали на чистоту (A260:A280 1,8–2,0; A230:A280 >1) с помощью спектрофотометрии и количественно определяли с помощью флуоресцентного анализа РНК Ribogreen (Molecular Probes, Eugene, OR) (19).

Один микрограмм РНК подвергали обратной транскрипции с использованием обратной транскриптазы вируса миелобластоза птиц (Promega, Аннандейл, Австралия) и 100 нг случайных гексануклеотидных праймеров (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) при 46°C в течение 90 мин. Все реакции проводились в трех повторах, и вариабельность между тремя повторениями оценивалась путем количественного определения 18S с помощью ПЦР в реальном времени с использованием Roche Lightcycler (Roche, Касл-Хилл, Новый Южный Уэльс, Австралия) (19).Были объединены тройные образцы с коэффициентом вариации 15%, чтобы преодолеть присущую RT изменчивость. Объединенные образцы кДНК, разбавленные 1:10, анализировали на экспрессию субъединиц ингибина/активина и мРНК ММП с использованием протокола, описанного ранее (19), при температуре отжига от 60 до 68°С, времени удлинения от 10 до 20 с и MgCl . 2 между 3 и 5 мм. В качестве праймеров использовали ММР-2 (5′-TGGGAGCATGGCGATGGATA-3′, 5′-ACAGTGGACATGGCGGTCTCA-3′), ММР-3 (5′-AGTCTTCCAATCCTACTGTTGCT-3′, 5′-TCCCCGTCACCTCCAATCC-3′), ММР-7 (5 ′-GTTTAGAAGCCAAACTCAAGG-3′, 5′-CTTTGACACTAATCGATCCAC-3′), MMP-9 (5′-GTATTTGTTCAAGGATGGGAAGTAC-3′, 5′-GCAGGATGTCATAGGTCACGTAG-3′), ингибин α (5′-ACGCTCAACTCCCCTGATG-3′, 5′ -ACCACCATGACAGTAGTGGAA-3′) и активин βA (5′-GGCTTGGAGTGGCGACGGC-3′, 5′-GCAGCCACACTCCTCCACAAT-3′).Стандарты были созданы с помощью обычной ПЦР (Hybaid PCR Express; Hybaid Instruments, Waltham, MA) и идентичность подтверждена секвенированием ДНК. Прогоны ПЦР повторяли с включением контроля качества.

Иммуногистохимия

Ингибин/активин

субъединицы α и βA были иммунолокализованы с использованием аффинно-очищенных кроличьих поликлональных антител (любезный подарок от проф. W. Vale, Институт биологических наук Солка, Ла-Хойя, Калифорния), как описано ранее (20) с модификациями.Вкратце, был проведен микроволновый поиск антигена, и антитела были применены в дозе 2 мкг/мл в неиммунном блоке, содержащем 10% козьей сыворотки (Sigma), 2% сыворотки человека и 0,1% Tween 20 (Bio-Rad) в трис-буферном солевом растворе. . IgG кролика (Dako, Glostrup, Дания) в концентрации 2 мкг/мл служил в качестве отрицательного контроля. Связывание антител определяли последовательным применением биотинилированного козьего антикроличьего IgG (Dako) и конъюгата авидин-биотин-пероксидазы (Dako) с хромогендиаминобензидином (Dako). Срезы тканей докрашивали гематоксилином Харриса.

ММП

Был использован аналогичный протокол со следующими адаптациями. Кроличье поликлональное антитело против MMP-7 человека (любезный подарок профессора Ф. Весснера, кафедра биохимии и молекулярной биологии, Университет Майами, Майами, Флорида) применяли в концентрации 0,5 мкг/мл. ММР-2, -3 и -9 выявляли с использованием моноклональных антител (Merck Biosciences, Kilsyth, Victoria, Australia), разведенных от 2 до 4 мкг/мл (21–23). Для MMP-9 не проводили нагревание в микроволновой печи. Лошадиная сыворотка (Sigma) использовалась в неиммунном блоке, а для MMP-2 Tween 20 не включался.Вторичным антителом был биотинилированный лошадиный антимышиный IgG (Vector Laboratories, Burlingame, CA). IgG кролика/мыши в концентрациях, соответствующих первичным антителам, использовали в качестве отрицательного контроля

Цитокератин

Использовали тот же протокол, что и для MMP-9, с панцитокератиновым антителом (Dako), разбавленным 1:4 в неиммунном блоке после ферментативного извлечения антигена (0,1% трипсина в 0,1% CaCl 2 в течение 15 мин при 37°C) .

Статистика

Данные были проанализированы с помощью ANOVA с апостериорным тестом Тьюки (обработка активином, ингибином и фоллистатином) или парным тестом Стьюдента t (эксперименты по децидуализации).

Результаты

Были проведены первоначальные эксперименты, чтобы убедиться, что экспрессия ММР и субъединиц ингибина/активина не нарушается при выделении клеток и культивировании. Условия культивирования были оптимизированы для исключения всех агентов (, например, фетальной телячьей сыворотки, BSA), которые, как известно, искусственно стимулируют активины/ММП. Это привело к низкой базовой экспрессии ингибинов, активинов и ММР, напоминающей экспрессию in vivo иммунореактивного белка (20, 24).

Влияние активина на продукцию ММР

Стромальные клетки экспрессировали мРНК ММР-2 и -3 (данные не показаны), а продукция белка только проММР-2 и -3 была подтверждена зимографией (фиг. 1А). Обработка стромальных клеток активином А стимулировала секрецию проММП-2 (рис. 1А). При 2 нм активин А индуцировал 2,2-кратное увеличение проММР-2 (рис. 1В, n = 4 клеточных препарата, P <0,05 против контроля). Эта доза впоследствии использовалась для всех анализов.Ингибин А (2 нМ) значительно снижал проММП-2 ( P < 0,05 по сравнению с контролем), а совместная обработка ингибином А с активином А в эквимолярных концентрациях аналогичным образом снижала проММП-2 ( P < 0,05 по сравнению с только активин; рис. 1В). Только фоллистатин (2 нМ) снижал уровни проММП-2 (незначительно). Активная ММП-2 была обнаружена только в одном из четырех препаратов стромальных клеток, где она следовала той же схеме, что и проММП-2. Никаких существенных различий в уровнях проММП-3 после лечения обнаружено не было (рис.1А).

Рис. 1.

Влияние активина А на продукцию ММР эндометриальными стромальными клетками, оцененное с помощью зимографии кондиционированных сред. A, Репрезентативные зимограммы (желатин и казеин), иллюстрирующие влияние на секрецию ММП: отсутствие лечения (C), активин A (Act; 1, 2 нМ), ингибин A (Inh; 2 нМ) в отсутствие и в присутствии экзогенного активина A (2 нм). B, влияние Act, Inh, Act + Inh и фоллистатина (FS; 2 нМ) на продукцию proMMP-2. Данные представляют собой среднее кратное изменение плотности полос по сравнению с контрольными уровнями ± sem для n = 4 отдельных клеточных препаратов.Активин сам по себе значительно стимулировал проММП-2 по сравнению с контрольными уровнями . Ингибин сам по себе значительно снижал уровни проММП-2 до уровня ниже контрольного уровня. Более того, ингибин противодействует активин-стимулируемой проММР-2. Значимые различия указаны между совпадающими буквами ( P < 0,05). C, сравнение действия Act (1 и 2 нМ) и TGFβ1 (0,2 и 2 нМ) на продукцию MMP-2 стромальными клетками с помощью желатиновой зимографии. D, количественная оценка эффектов лечения Act и TGFβ1 на секрецию proMMP-2 и proMMP-3.Представитель двух экспериментов.

Рис. 1.

Влияние активина А на продукцию ММР эндометриальными стромальными клетками, оцененное с помощью зимографии кондиционированных сред. A, Репрезентативные зимограммы (желатин и казеин), иллюстрирующие влияние на секрецию ММП: отсутствие лечения (C), активин A (Act; 1, 2 нМ), ингибин A (Inh; 2 нМ) в отсутствие и в присутствии экзогенного активина A (2 нм). B, влияние Act, Inh, Act + Inh и фоллистатина (FS; 2 нМ) на продукцию proMMP-2. Данные представляют собой среднее кратное изменение плотности полос по сравнению с контрольными уровнями ± sem для n = 4 отдельных клеточных препаратов.Активин сам по себе значительно стимулировал проММП-2 по сравнению с контрольными уровнями . Ингибин сам по себе значительно снижал уровни проММП-2 до уровня ниже контрольного уровня. Более того, ингибин противодействует активин-стимулируемой проММР-2. Значимые различия указаны между совпадающими буквами ( P < 0,05). C, сравнение действия Act (1 и 2 нМ) и TGFβ1 (0,2 и 2 нМ) на продукцию MMP-2 стромальными клетками с помощью желатиновой зимографии. D, количественная оценка эффектов лечения Act и TGFβ1 на секрецию proMMP-2 и proMMP-3.Представитель двух экспериментов.

Эффект активина А сравнивали с эффектом ТФР-β1: проММП-2 и проММП-3 стимулировали 1 и 2 нМ активина А, но снижали аналогичными концентрациями ТФР-β1. Репрезентативная зимограмма желатина показана на рис. 1С. Из-за значительных различий в степени ответа между клеточными препаратами репрезентативные данные двух экспериментов как для проММП-2, так и для проММП-3 показаны на рис. 1D. Как и прежде, активная ММП-2 была обнаружена в одном из двух клеточных препаратов и следовала той же схеме, что и проММП-2 (рис.1С).

Эпителиальные клетки экспрессировали мРНК для MMPs-2, -3, -7 и -9 (не показаны), и все они были обнаружены на уровне белка с помощью зимографии (рис. 2, A и C). Эпителиальные клетки (n = 4–6 клеточных препаратов) обрабатывали активином А, ингибином А вместе и фоллистатином (2 нМ). Активин А значительно стимулировал продукцию проММП-2, -3 и -7 ( P < 0,05 по сравнению с контролем ) и незначительно стимулировал проММП-9 и активную ММП-2 (рис. 2, B и D). Ингибин А сам по себе сильно ингибировал выработку и активацию только проММП-2, но препятствовал экзогенной стимуляции активином всех ММП (значительно для ММП-2, -3, -7; P <0.05 по сравнению с только активином). Фоллистатин не оказывал существенного влияния на уровни ММР в эпителиальных клетках в отсутствие экзогенного активина.

Рис. 2.

Влияние активина А (Act) и ингибина A (Inh) (2 нМ) на ММП эпителиальных клеток эндометрия, оцененное с помощью желатиновой и казеиновой зимографии кондиционированных сред. Необработанные клетки служили контролем (С). A, репрезентативная желатиновая зимограмма; и B, анализ proMMP-2, proMMP-9 и активной MMP-2 с помощью денситометрии.C, репрезентативная казеиновая зимограмма; и D, анализ уровней proMMP-3 и proMMP-7. Результаты представлены как среднее ± кратное отклонение от контрольных уровней (объединенные данные из n = 4–6 экспериментов). Значимые различия ( P <0,05) обозначены совпадающими буквами : между лечением Act и контролем для proMMPs-2, -3, -7 и активной MMP-2, между лечением Inh и контролем только для proMMP-2, и между совместным лечением Act + Inh по сравнению с лечением только Act для proMMPs-2, -3, -7 и активного MMP-2.

Рис. 2.

Влияние активина А (Act) и ингибина A (Inh) (2 нМ) на ММП эпителиальных клеток эндометрия, оцененное с помощью желатиновой и казеиновой зимографии кондиционированных сред. Необработанные клетки служили контролем (С). A, репрезентативная желатиновая зимограмма; и B, анализ proMMP-2, proMMP-9 и активной MMP-2 с помощью денситометрии. C, репрезентативная казеиновая зимограмма; и D, анализ уровней proMMP-3 и proMMP-7. Результаты представлены как среднее ± кратное отклонение от контрольных уровней (объединенные данные из n = 4–6 экспериментов).Значимые различия ( P <0,05) обозначены совпадающими буквами : между лечением Act и контролем для proMMPs-2, -3, -7 и активной MMP-2, между лечением Inh и контролем только для proMMP-2, и между совместным лечением Act + Inh по сравнению с лечением только Act для proMMPs-2, -3, -7 и активного MMP-2.

Эндогенную экспрессию мРНК ингибина и активина оценивали с помощью ПЦР в реальном времени: мРНК ингибина α практически отсутствовала в эпителиальных и стромальных клетках (<0,0.05 фг/мкг 18S), тогда как мРНК активина βA была в изобилии в эпителиальных клетках (150 фг/мкг 18S против 3 фг/мкг 18S в стромальных клетках) (не показано). Это было подтверждено измерением секреции димерного ингибина А и активина А с помощью ELISA: уровни ингибина А составляли 5–32 пг/10 5 клеток из клеток эндометрия, тогда как активин А секретировался на уровне 5000 пг/10 5 клеток. из эпителиальных и 1000 пг/10 5 клеток из стромальных клеток (не показано).

Активин и ММП в децидуализированных стромальных клетках

Чтобы исследовать взаимосвязь между ингибином, активином и ММП после децидуализации, сильно децидуализированные клетки, как определено по секреции пролактина, были получены путем обработки цАМФ в течение 8 дней (n = 3; рис.3А). Уровни экспрессии субъединиц ингибина α/активина βА и ММР-2, -3, -9 количественно определяли с помощью ПЦР в реальном времени на 8-й день. Экспрессия мРНК субъединицы ингибина α была очень низкой в ​​децидуальных клетках (0,2 фг/мкг 18S, не показано). ), тогда как мРНК субъединицы βA активина повышалась более чем в 7 раз после децидуализации, индуцированной цАМФ ( P <0,05; рис. 3B). ММР-2, -3, -9 мРНК аналогичным образом активировались в децидуализированных клетках, но это не достигло значимости из-за вариабельности между отдельными клеточными препаратами (рис.3С). Эта картина была подтверждена на уровне белка: секреция ингибина А была минимальной из децидуальных клеток (32 пг/10 5 клеток, не показано), активность активина А повышалась примерно в 5 раз до 5000 пг/ 10 5 ячеек (4). ProMMP-2, -3 и -9, а также активная MMP-2 активировались при децидуализации (репрезентативные зимограммы, рис. 3D). ProMMP-1 был обнаружен на низких уровнях и не изменился при децидуализации. мРНК или белок MMP-7 не были обнаружены, что согласуется с его специфичностью к эпителию.Более того, субъединица активина βА и ММП-2, -3, -9 иммунолокализованы в децидуальных клетках ранней беременности (рис. 4, А–Е). Иммунореактивной α-субъединицы ингибина или ММР-7 обнаружено не было.

Рис. 3.

Экспрессия и продукция активина βА и ММП децидуализированными стромальными клетками. А, продукция пролактина из стромальных клеток, децидуализированных цАМФ, в течение 8 дней. Значительная децидуализация была достигнута на 8-й день лечения ( P <0,05). Данные по n = 3 препаратам отдельных клеток.Количественное определение экспрессии (B) активина βA и (C) MMPs-2, -3 и -9 мРНК с помощью ПЦР в реальном времени в контрольных (ноль) и обработанных цАМФ клетках на 8-й день децидуализации. Уровни экспрессии показаны в фемтограммах на пикограммы мРНК 18S. Активин βA значительно активировался в децидуализованных клетках по сравнению с контрольными клетками ( P <0,05), тогда как для MMP наблюдалось незначительное увеличение. D, продукция ММР из тех же клеток, оцененная с помощью зимографии кондиционированных сред (представитель трех экспериментов).E и F, влияние активина (Act, 0–4 нм; E) и фоллистатина (FS, 0–3 нм; F) на продукцию проММП-2 клетками in vitro -децидуализированных клеток. Данные в E + F взяты из 8 дней индуцированной прогестероном децидуализации, n = 2 эксперимента; баров обозначают диапазон.

Рис. 3.

Экспрессия и продукция активина βА и ММП децидуализированными стромальными клетками. А, продукция пролактина из стромальных клеток, децидуализированных цАМФ, в течение 8 дней. Значительная децидуализация была достигнута на 8-й день лечения ( P < 0.05). Данные по n = 3 препаратам отдельных клеток. Количественное определение экспрессии (B) активина βA и (C) MMPs-2, -3 и -9 мРНК с помощью ПЦР в реальном времени в контрольных (ноль) и обработанных цАМФ клетках на 8-й день децидуализации. Уровни экспрессии показаны в фемтограммах на пикограммы мРНК 18S. Активин βA значительно активировался в децидуализованных клетках по сравнению с контрольными клетками ( P <0,05), тогда как для MMP наблюдалось незначительное увеличение. D, продукция ММР из тех же клеток, оцененная с помощью зимографии кондиционированных сред (представитель трех экспериментов).E и F, влияние активина (Act, 0–4 нм; E) и фоллистатина (FS, 0–3 нм; F) на продукцию проММП-2 клетками in vitro -децидуализированных клеток. Данные в E + F взяты из 8 дней индуцированной прогестероном децидуализации, n = 2 эксперимента; баров обозначают диапазон.

Рис. 4.

Иммунолокализация субъединиц ингибина/активина и ММР на границе раздела мать-плод на ранних сроках беременности человека. A – F, в децидуальной оболочке: (A) ингибин α, (B) активин αA, (C) IgG кролика (отрицательный), (D) ММП-2, (Е) ММП-3 и (F) ММП-9 в материнской децидуальной оболочке.G, кончик ворсинок первого триместра и столбец клеток (CC), идентифицированный цитокератином (CK). Стрелки указывают направление инвазии в децидуальную оболочку. H, серийный срез, иммуноокрашенный на активин βA. Стрелки показывают окрашивание синцитиотрофобласта и синцитиализирующего трофобласта на дистальных концах СС. I, изображение с большим увеличением интенсивного окрашивания ингибина α в сливающемся трофобласте. J и K, иммуноокрашивание MMP-2 кончиков ворсинок. Окрашивание присутствует только в трофобласте в дистальной области СС и в EVT, отрывающих СС и входящих в децидуальную оболочку ( стрелки ).L, иммуноокрашивание ММР-9 в ворсинчатом цитотрофобласте, СС и лейкоцитах в межворсинчатом пространстве (*). M, Идентификация iEVTs и vEVTs в первом триместре децидуальной оболочки с CK. N, Серийный срез, окрашенный на активин βA, показывает окрашивание в vEVT, но не в iEVT. Серийные срезы с большим увеличением, окрашенные на (O) CK и (P) ингибин α в iEVT. Q, Интенсивное иммунное окрашивание на MMP-2 в iEVT ( наконечников стрелок ), окружающих материнский сосуд в децидуальной оболочке. RU, серийно окрашенные децидуальные срезы, идентифицирующие iEVT с CK, что указывает на колокализацию с MMP-2, но не с MMP-9. Масштабные линейки , 50 мкм.

Рис. 4.

Иммунолокализация субъединиц ингибина/активина и ММП на границе материнского плода на ранних сроках беременности человека. A – F, в децидуальной оболочке: (A) ингибин α, (B) активин αA, (C) IgG кролика (отрицательный), (D) ММП-2, (Е) ММП-3 и (F) ММП-9 в материнской децидуальной оболочке. G, кончик ворсинок первого триместра и столбец клеток (CC), идентифицированный цитокератином (CK). Стрелки указывают направление инвазии в децидуальную оболочку. H, серийный срез, иммуноокрашенный на активин βA. Стрелки показывают окрашивание синцитиотрофобласта и синцитиализирующего трофобласта на дистальных концах СС. I, изображение с большим увеличением интенсивного окрашивания ингибина α в сливающемся трофобласте. J и K, иммуноокрашивание MMP-2 кончиков ворсинок. Окрашивание присутствует только в трофобласте в дистальной области СС и в EVT, отрывающих СС и входящих в децидуальную оболочку ( стрелки ). L, иммуноокрашивание ММР-9 в ворсинчатом цитотрофобласте, СС и лейкоцитах в межворсинчатом пространстве (*).M, Идентификация iEVTs и vEVTs в первом триместре децидуальной оболочки с CK. N, Серийный срез, окрашенный на активин βA, показывает окрашивание в vEVT, но не в iEVT. Серийные срезы с большим увеличением, окрашенные на (O) CK и (P) ингибин α в iEVT. Q, Интенсивное иммунное окрашивание на MMP-2 в iEVT ( наконечников стрелок ), окружающих материнский сосуд в децидуальной оболочке. RU, серийно окрашенные децидуальные срезы, идентифицирующие iEVT с CK, что указывает на колокализацию с MMP-2, но не с MMP-9. Масштабные линейки , 50 мкм.

Чтобы выяснить, являются ли ММР потенциальными нижестоящими медиаторами активин-стимулируемой децидуализации, уровни ММР оценивали там, где индуцированная прогестероном децидуализация ускорялась (в 2-3 раза) за счет добавления активина А (n = 2) или ослаблялась (∼ 25%) путем нейтрализации биоактивности активина фоллистатином (n = 2) (4). Активин А (0,4–4 нМ) стимулировал секрецию и активацию проММП-2 на 8-й день децидуализации (рис. 3Е). Кроме того, секреция проММП-2 снижалась на 8-й день децидуализации в присутствии фоллистатина (фиг.3F).

Активин, ингибин и ММП во время инвазии трофобласта

Пространственная экспрессия субъединиц MMP-2, -7, -9 и ингибина α/активина βA оценивалась в подтипах трофобласта в серийных срезах мест имплантации при нормальных беременностях человека. Клетки трофобласта идентифицировали иммуноокрашиванием на цитокератин.

Иммуноокрашивание активина Субъединица βА отсутствовала в колонках заякоренных клеток (рис. 4H), но была сильно экспрессирована вместе с α-субъединицей в клетках трофобласта, подвергшихся слиянию на концах и краях колонок (рис.4, З и I). Клетки цитотрофобласта в верхней клеточной колонке были отрицательными в отношении MMP-2, но его экспрессия резко повышалась в дистальных клетках, а EVT отщеплялись и проникали в децидуальную оболочку (рис. 4, J и K). ММР-7 (не показано) и -9 (фиг. 4L) сильно экспрессировались клетками цитотрофобласта всех столбцов.

iEVT, вторгающиеся в децидуальную оболочку, не экспрессировали α-субъединицу ингибина, а лишь слабо экспрессировали активин βA (рис. 4, N и P). Однако iEVT были интенсивно окрашены для MMP-2 (рис. 4, Q и S), тогда как окрашивание для MMP-7 (не показано) и MMP-9 было слабым или отсутствовало (рис.4У). Наоборот, сильное иммунное окрашивание на активин βА и ингибин α было обнаружено во вставках vEVT (рис. 5, B и C). Экспрессия MMP-2 была резко снижена в vEVT (рис. 5D), тогда как MMP-7 и 9 сохранялись (рис. 5, E и F).

Рис. 5.

Колокализация ингибина, активина и ММР в субпопуляциях трофобласта в первом триместре беременности. A, Идентификация внутрисосудистых пробок EVT в материнских сосудах с окрашиванием цитокератином (CK). Интенсивное иммуноокрашивание для (B) активина βA и (C) ингибина α было обнаружено во вставках vEVT.D, иммуноокрашивание MMP-2 было заметно снижено в vEVT, но сильно в iEVT (i). Напротив, (E) MMP-7 и (F) MMP-9 положительно иммуноокрашивали пробки vEVT и интенсивно окрашивали окружающие нейтрофилы и макрофаги ( звездочки ). Увеличенные, часто многоядерные клетки цитотрофобласта в материнской децидуальной оболочке, которые считаются гигантскими клетками, сильно окрашиваются на (G) ингибин α и (H и I) активин βA. J-L, Контроль специфичности иммунного окрашивания в синцитиотрофобласте, демонстрирующий отсутствие окрашивания кроличьим IgG и образцы окрашивания ингибина α и активина βA.M, MMP-2 отсутствовал в цито- и синцитиотрофобласте ворсин, тогда как (N) MMP-9 интенсивно локализовался только в клетках цитотрофобласта. MMP-9-положительные лейкоциты показаны звездочками . Масштабные линейки , 50 мкм.

Рис. 5.

Колокализация ингибина, активина и ММР в субпопуляциях трофобласта в первом триместре беременности. A, Идентификация внутрисосудистых пробок EVT в материнских сосудах с окрашиванием цитокератином (CK). Интенсивное иммуноокрашивание для (B) активина βA и (C) ингибина α было обнаружено во вставках vEVT.D, иммуноокрашивание MMP-2 было заметно снижено в vEVT, но сильно в iEVT (i). Напротив, (E) MMP-7 и (F) MMP-9 положительно иммуноокрашивали пробки vEVT и интенсивно окрашивали окружающие нейтрофилы и макрофаги ( звездочки ). Увеличенные, часто многоядерные клетки цитотрофобласта в материнской децидуальной оболочке, которые считаются гигантскими клетками, сильно окрашиваются на (G) ингибин α и (H и I) активин βA. J-L, Контроль специфичности иммунного окрашивания в синцитиотрофобласте, демонстрирующий отсутствие окрашивания кроличьим IgG и образцы окрашивания ингибина α и активина βA.M, MMP-2 отсутствовал в цито- и синцитиотрофобласте ворсин, тогда как (N) MMP-9 интенсивно локализовался только в клетках цитотрофобласта. MMP-9-положительные лейкоциты показаны звездочками . Масштабные линейки , 50 мкм.

Кроме того, субъединицы ингибина α и активина βA иммуноокрашивали увеличенные одно- и многоядерные клетки трофобласта, идентифицированные как гигантские клетки цитотрофобласта (рис. 5, G и H) и синцитиальные фрагменты (рис. 5I). Окрашивания ММП не наблюдалось (не показано). Лейкоциты в ворсинах и децидуальной оболочке интенсивно окрашиваются на ММП и активин βА-субъединицу.Специфичность иммуноокрашивания субъединиц ингибина была подтверждена их селективным окрашиванием в синцитио-, но не в ворсинчатом цитотрофобласте (25) (рис. 5, К и М). ММП не продуцируются синцитиотрофобластом; однако цитотрофобласты ворсинок были сильно положительными по ММР-7 (не показано) и -9 (фиг. 5N). Эти данные суммированы на фиг. 6А.

Рис. 6.

A, Сводка паттернов иммунного окрашивания на ингибин, активин и ММП в клетках матери и плода в местах имплантации человека в первом триместре (2+, сильное присутствие; +, присутствие; +/−, низкие уровни; − , необнаружимый).DEC, Децидуа; CC, столбец ячеек; CG, гигантская клетка; ST, синцитиотрофобласт; КТ, ворсинчатый цитотрофобласт. B, Предполагаемые взаимодействия во время инвазии трофобласта. Активин, полученный из DEC, является потенциальным триггером для экспрессии MMP-2 цитотрофобластами в дистальном CC и в инвазивном iEVT. Начало экспрессии ингибина а в пробках GC и vEVT может быть ответственным за подавление ММР-2 в этих клетках посредством его антагонистического действия на активин.

Рис. 6.

A, Сводка паттернов иммунного окрашивания на ингибин, активин и ММП в клетках матери и плода в местах имплантации человека в первом триместре (2+, сильное присутствие; +, присутствие; +/-, низкие уровни; −, необнаружимо).DEC, Децидуа; CC, столбец ячеек; CG, гигантская клетка; ST, синцитиотрофобласт; КТ, ворсинчатый цитотрофобласт. B, Предполагаемые взаимодействия во время инвазии трофобласта. Активин, полученный из DEC, является потенциальным триггером для экспрессии MMP-2 цитотрофобластами в дистальном CC и в инвазивном iEVT. Начало экспрессии ингибина а в пробках GC и vEVT может быть ответственным за подавление ММР-2 в этих клетках посредством его антагонистического действия на активин.

Обсуждение

Это исследование демонстрирует, что активин А стимулирует выработку ММП (проММП-2, -3, -7, -9) клетками эндометрия.Активация ММП-2 также усиливалась активином, параллельно с увеличением доступности латентной формы. Кроме того, ингибин А противодействует индукции активином ММП и является мощным ингибитором проММП-2. Повышающая регуляция ММР с помощью активина А согласуется с действиями в других типах клеток (10, 11), предполагая, что модуляция ММР является основным последующим действием активина во время ремоделирования ткани, например. заживление ран, эмбриогенез и воспаление. Таким образом, активин и TGFβs (9), по-видимому, являются противоположными регуляторами MMPs в клетках эндометрия, что согласуется с их противоположными эффектами на инвазию цитотрофобласта (10, 26) и плацентарный стероидогенез (27).Это указывает на различные пути передачи сигналов для активинов и TGFβs в эндометрии и плаценте, либо посредством дифференциального фосфорилирования Smads, как в клетках гипофиза (28), либо посредством использования специфических нижестоящих кофакторов.

Ингибин был мощным антагонистом активина в клетках эндометрия, подавляя стимулирующий эффект активина на ММР в эквимолярных концентрациях. Как эндометрий, так и плацента экспрессируют рецепторы активина типа II и бетагликан (29, 30), придавая чувствительность к ингибино-опосредованному антагонизму действия активина (31).Однако это первая демонстрация функции ингибина в матке. Роль ауто/паракринного ингибина сомнительна, поскольку уровни ингибина в эндометрии ограничены. Тем не менее, ингибин является мощным эндокринным гормоном и циркулирует в больших количествах на протяжении всего менструального цикла, когда продукция ММП подавлена ​​(32). Отмена прогестерона перед менструацией снимает подавление ММР в эндометрии и запускает ММР-опосредованное разрушение эндометрия (16). Поскольку уровни ингибина А соответствуют уровням прогестерона в лютеиновой фазе, можно ожидать параллельную роль.Более того, резкое увеличение ингибина В (считается, что его действие аналогично действию ингибина А) в поздней менструальной фазе (33) потенциально представляет собой ранее неизвестный эндокринный механизм прекращения продукции ММР, связанной с менструацией.

Хотя все ММР стимулировались активином, ММР-2 была более чувствительна к ингибированию ингибином, чем другие ММР. То, что MMP регулируются по-разному, хорошо известно (rev. Ref.34). Однако MMP-2 необычна тем, что ее промотор не содержит активаторного белка-1 или вирусных элементов, усиливающих полиома-3/E26, присутствующих в большинстве других MMP, экспрессируемых в эндометрии, хотя у него есть два сайта связывания SP1. 35).В некоторых типах клеток экспрессия MMP-2 может быть индуцирована TGFβ (36), но в целом уровни экспрессии практически не зависят от действия факторов роста и цитокинов. Очевидно, что баланс стимулирующих и ингибирующих факторов в конкретной микросреде будет определять выход ММР. Это, несомненно, связано с отдельными функциями; например, в плаценте экспрессия ММП-2 соответствует инвазивному потенциалу цитотрофобласта, тогда как ММП-7 и -9 максимальны в статических, но метаболически активных клетках (90–249 e.грамм. ворсинчатых цитотрофобластов, вЭВЦ).

Ингибин А был более сильным антагонистом в стромальных, чем в эпителиальных клетках; ингибирующего действия на эпителиальные ММП-3, -7, -9 в отсутствие экзогенного активина не наблюдалось. Вероятно, это связано с различиями в уровнях эндогенного активина. Хотя продукция активина эпителиальными клетками примерно в 5 раз выше, чем стромальными клетками, фоллистатин коэкспрессируется в эпителиальных, но не в стромальных клетках эндометрия (29). Таким образом, биоактивный активин может быть незначительным в эпителиально-кондиционированных средах.Эта концепция также подтверждается неспособностью лечения фоллистатином подавлять эпителиальные ММП.

Активин А значительно усиливается в децидуализирующихся клетках и способствует децидуальной прогрессии (4). Экспрессия ингибина ограничена в децидуальной оболочке, что указывает на среду с преобладанием активина. Одновременно с активацией активина мы наблюдаем повышение уровня децидуальных ММР-2, -3, -9, и действительно, продукция и активация ММР-2 дополнительно увеличиваются при обработке децидуализирующихся клеток активином.Ингибирование ММП препятствует процессу децидуализации (5–7). Подобное ослабление децидуализации происходит при нейтрализации активином (4, 37), что, как мы здесь показываем, приводит к уменьшению проММР-2. Эти данные подтверждают физиологическое взаимодействие между активинами и ММР во время децидуализации и подтверждают гипотезу о том, что активин способствует прогрессированию децидуальной активности, по крайней мере частично, за счет повышения продукции ММР.

Плацента является важным источником ингибинов/активинов, главным образом из синцитиотрофобласта (25), и определена его роль в регуляции плацентарного стероидогенеза (38).Кроме того, экзогенный активин способствует дифференцировке EVT и секреции MMP-2 в модели in vitro инвазии трофобласта (10). Наши данные in vivo подтверждают это, демонстрируя, что материнская децидуальная оболочка является основным источником активина и что ММР-2 поразительно активируется в клетках цитотрофобласта, когда они контактируют и проникают через богатую активином децидуальную оболочку. Поэтому мы предполагаем, что активин является важным компонентом децидуальной секреции, стимулирующей ММП трофобласта (14).

Иммуногистохимия имеет неоценимое значение для определения экспрессии белка отдельными клеточными популяциями in vivo . В местах ранней имплантации отдельные популяции трофобластов четко экспрессируют специфический репертуар ингибина, активина и ММП. MMP-2, по-видимому, связан с миграцией цитотрофобласта, что согласуется с его обилием в iEVT при внематочной беременности (39). Наоборот, MMP-7 и -9 экспрессировались неподвижными цитотрофобластами, что предполагает их роль в процессинге, а не в инвазии, и указывает на дифференциальную регуляцию MMP микроокружающей средой цитокинов/факторов роста.Эти данные контрастируют с исследованиями с использованием первичных клеток цитотрофобласта, которые приписывают MMP-9 инвазивный потенциал (13, 40). Однако изолированные клетки цитотрофобласта, вероятно, представляют собой смешанную популяцию, и мы демонстрируем, что MMP-9 в изобилии присутствует во всех подтипах цитотрофобластов, за исключением незначительной популяции iEVT. Уровни ММР-9 снижаются в изолированных цитотрофобластах по мере продвижения беременности: однако ряд других ММР (включая ММР-2) строго подавляются после первого триместра (41).Более того, инвазия трофобласта ограничена in vitro нейтрализацией MMP-2 (42). Это указывает на видоспецифичные различия в плацентации, поскольку MMP-9 является преобладающей MMP в мышиных инвазивных гигантских клетках (6).

Отсутствие MMP-2, но сохранение MMP-7 и -9 наблюдалось в эндоваскулярных агрегатах vEVT, что согласуется с прекращением их миграции. Интересно, что в vEVT одновременно наблюдалась сильная иммунореактивность субъединиц ингибина/активина. Сходный профиль экспрессии наблюдается в гигантских клетках человека – терминальное состояние дифференцировки iEVTs – снова связанное с потерей миграционного потенциала (12).Инвазия EVT должна быть жестко ограничена, чтобы предотвратить чрезмерное вторжение в миометрий и сосудистую сеть. Учитывая повышенную продукцию субъединиц ингибина с параллельным снижением продукции MMP-2 в иммобилизованных популяциях EVT, заманчиво предположить, что ингибин способствует снижению инвазивности трофобласта.

Триггер экспрессии субъединицы ингибина в цитотрофобластах неизвестен. Однако место имплантации поддерживается в гипоксическом состоянии, и считается, что это имеет решающее значение для регуляции дифференцировки трофобласта (43).Индуцирование плацентарной гипоксии in vitro значительно подавляет выработку ингибина и активина (44). Это говорит о том, что ингибин/активин может повышаться по мере того, как vEVT проникают в материнские сосуды и сталкиваются с богатой кислородом средой. Гигантские клетки также продуцируют субъединицы ингибина/активина. Эти увеличенные клетки являются многоядерными, и аналогичная активация субъединиц ингибина/активина происходит при синцитиализации in vivo и in vitro (45). Является ли это причиной или следствием, неизвестно, поскольку синцитиальное образование четко не определено.

Таким образом, мы показываем, что активин А стимулирует ММП эндометрия, а ингибин сильно противодействует действию активина. Взаимосвязь между активином А и ММР-2 предполагает, что активация ММР является последующим событием во время децидуализации, стимулируемой активином. Паттерны пространственной экспрессии ингибина/активина и ММР в местах внутриматочной имплантации демонстрируют, что цитотрофобласт ММР-2 активируется при контакте с децидуальной оболочкой; таким образом, мы предполагаем, что активин децидуального происхождения важен для стимуляции инвазии iEVT (рис.6Б). Физиологическое значение ингибирования MMP-2 ингибином подкрепляется отсутствием их колокализации в популяциях цитотрофобласта, что указывает на то, что аутокринная продукция ингибина α может быть критическим переключением во время дифференцировки трофобласта. Таким образом, эти данные указывают на ряд механизмов, посредством которых активины и ингибины могут способствовать двунаправленной связи между материнскими и фетальными клетками во время установления беременности.

Благодарности

Мы признательны за техническую помощь Ту’ухевахе Кайту’у, Премиле Пайва, Натали Ханнан, Ашвини Чанд и Сью Панкридж.

Сокращения

  • ВКМ,

  • ЭВТ,

    вневорсинчатый цитотрофобласт;

  • iEVT,

  • ММП,

    матриксная металлопротеиназа;

  •  
  • правый,

  •  
  • vEVT,

Каталожные номера

1

Sharkey

AM

,

Smith

SK

2003

Эндометрий как причина неудачи имплантации.

лучший результат Res Clin Obstet Gynaecol

17

:

289

307

2

Dimitriadis

E

,

ROBB

L

,

Salamonsen

La

2002

Интерлейкин 11 авансов Индуцированная прогестероном децидуализация стромальных клеток эндометрия человека.

Mol Hum Reford

8

:

636

643

3

Zoumakis

E

,

Margioris

AN

,

stournaras

C

,

dermitzaki

E

,

Angelakis

E

,

Makrigiannakis

A

,

Koumantakis

E

,

E

A

E

A

20002 A

2000

Corticotrophin-релизованный гормон (CRH) взаимодействует с воспалительными простагландинами и интерлейкинами и влияет на децидулизацию эндомметрии человека. .

Mol HUM REPROD

6

:

344

3444

351

40003

RL

,

RL

,

Salamonsen

La

,

Rindlay

JK

2002

2002

Activin A Actives Applestes Andomate децидуализация клеток in vitro .

J Clin Endcrinol Metab

87

:

4001

4004

4004

5

Rectman

,

Zhang

J

,

Salamonsen

J

,

Salamonsen

La

1999

Эффект ингибирования матрицы металлопротеиназы при децидуализации и имплантации эндометрия у спаренных крыс.

J Reford Fertil

117

:

169

177

6

Alexander

,

см

,

Hansell

EJ

,

Behrendtsen

O

,

Фланна

мл

,

Kishnani

NS

,

Hawkes

SP

,

Werb

Z

1996

Экспрессия и функция матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов во время имплантации мыши на границе материнского эмбриона.

Development

122

:

1723

1723

1723

70002 1736

70003

Z

,

SZMIDT

M

,

Srisuparp

M

,

,

Fazlebas

AT

2003

Ингибирование матриксных металлопротеиназ предотвращает синтез инсулиноподобного фактора роста, связывающего белок-1, во время децидуализации у павиана.

Эндокринология

144

:

5339

5339

5346

5346

8

5346

8

MCCAWLEY

LJ

,

LJ

,

LM

2001

Матрица МАТрикс Металлопротеиназы: они больше не только для матрицы!

CUR CUR CUR CUR CUR CUREM INCAIL BIOL

13

:

540002

540

:

540

540

Остена

кг

,

кг

,

Igarashi

Tm

,

Bruner-Tran

KL

2003

Прогестерон эндометрий человека: индукция уникальной тканевой среды, которая ограничивает экспрессию матриксной металлопротеиназы (ММП)

.

Front Biossi

8

:

D78

D86

Caniggia

I

,

Lye

SJ

,

Cross

JC

1997

Activin – это местный регулятор дифференцировка клеток цитотрофобласта человека.

Эндокринология

138

:

3976

:

3976

3976

11

K

,

Funaba

K

M

,

Mathews

Mizutani

LS

,

Mizutani

T

2000

Activin A стимулирует выработку коллагеназы IV типа (матриксной металлопротеиназы-2) в перитонеальных макрофагах мыши.

J Immunol

j Immumunol

165

:

2997

3997

3003

12

Loke

YW

,

King

A

1995

Человеческая имплантация.

Клеточная биология и иммунология

.

Кембриджский университет пресс

,

Cambridge

13

Fisher

SJ

,

Leitch

MS

,

Kantor

MS

,

Basbaum

CB

,

Kramer

RH

1985

Деградация внеклеточного матрикса трофобластическими клетками плаценты человека в первом триместре беременности.

J Cell Biochem

27

:

31

41

14 20002

Bischof

P

,

Meisser

A

,

Campana

A

A

,

TSENG

A

,

TSENG

L

1998

Влияние среды, кондиционированной децидуальной оболочкой, и белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, на металлопротеиназы трофобластического матрикса и их ингибиторы.

Placenta

19

:

457

464

15

мм

,

Hampton

AL

,

Riley

SC

,

Findlay

JK

,

Salamonsen

La

1994

Производство и характеристика эндотелина, высвобождаемого эпителиальными клетками эндометрия человека в культуре.

J Clin EndCrinol Metab

79

:

1625

1625

1631

1602

Salamonsen

La

,

,

La

AR

,

Hammond

,

Hammond

FR

,

GARCIA

S

,

Чжан

J

1997

Продукция матричных металлопротеиназ эндометрия, но не их тканевых ингибиторов, модулируется отменой прогестерона в модели in vitro для менструации.

J Clin EndCrinol Metab

82

:

1409

1409

1415

17

Landgren

BM

,

Collins

A

,

Csemiczky

G

,

Burger

HG

,

Baksheev

L

,

Robertson

DM

2004

Переход в менопаузу: ежегодные изменения гормонального фона в сыворотке крови в течение менструального цикла у женщин в течение девятилетнего периода до наступления менопаузы.

J Clin Endcreinol Metab

89

:

2763

2763

2769

2769

18

DE

,

JP

,

Ten Dijke

P

,

De Vries

CJ

,

VAN Achterberg

TA

,

sugino

h

,

de waele

p

,

huylebroceeck

d

,

verschueren

k

,

van den eijnden-van raaij

aj

1996

100002 1996

Фоллистаты биоактивность за счет ингибирования связывания активина с его рецепторами II типа.

моль ячейки эндокринол

116

:

105

114

1

114

19

Jones

RL

,

Hannan

NJ

,

KAITU’U

TJ

,

Zhang

J

,

Salamonsen

LA

2004

Идентификация хемокинов, важных для рекрутирования лейкоцитов в эндометрий человека во время имплантации эмбриона и менструации.

J Clin Endxrinol Metab

89

:

6155

6155

6167

20

Jones

RL

,

Salamonsen

La

,

Critchley

HO

,

Rogers

PA

,

Affandi

B

,

Findlay

JK

2000

Субъединицы ингибина и активина по-разному экспрессируются в клетках и лейкоцитах эндометрия во время менструального цикла, на ранних сроках беременности и у женщин, применяющих только прогестиновые контрацептивы.

Mol Hum Reford

6

:

1107

1117

21

Vincent

AJ

,

Malakooti

N

,

Zhang

J

,

Rogers

PA

,

Affandi

B

,

Salamonsen

LA

1999

Разрушение эндометрия у женщин, принимающих Норплант, связано с мигрирующими клетками, экспрессирующими матриксную металлопротеиназу-9 (желатиназу B).

HUM REPROD

14

:

807

815

22

VINCENT

AJ

,

Чжан

J

,

ostor

A

,

Rogers

PA

,

Affandi

B

,

Kovacs

G

,

Salamonsen

LA

2000

Матриксные металлопротеиназы-1 и -3 и тучные клетки присутствуют в эндометрии женщин, использующих противозачаточные средства.

HUM REPROD

15

:

123

130

23

Чжан

J

,

Hampton

AL

,

NIE

G

,

Salamonsen

La

2000

Прогестерон ингибирует активацию латентной матриксной металлопротеиназы (ММР)-2 с помощью ММР мембранного типа 1: ферментов, координированно экспрессируемых в эндометрии человека.

биол репродузы

62

:

85

94

240003 –

94

240003 –

94

240003

Salamonsen

La

,

WOLLY

DE

1996 DE

1996

Матрица Метрикс металлопротеиназы в нормальной менструации

.

HUM REPROD

11

(

SUL 2

):

124

133

25

Minami

S

,

Yamoto

M

,

Nakano

R

1992

Иммуногистохимическая локализация субъединиц ингибина/активина в плаценте человека.

Obstet Gynecol

80

:

410

414

26

26

Chakraborty

C

,

Gleeson

LM

,

McKinnon

T

,

LALA

PK

2002

Регуляция миграции и инвазивности трофобласта человека.

CAN J Pharmacol

80

:

116

124

27

,

Y

,

Keelan

J

,

Франция

JT

1996

Activin-A Стимулирует, в то время как трансформирующий фактор роста β 1 ингибирует продукцию хорионического гонадотропина и активность ароматазы в культивируемых плацентарных трофобластах человека.

Placenta

170003:

603

610

28

Suszko

MI

,

Balkin

DM

,

CHEN

Y

,

Woodruff

TK

2005

Smad3 опосредует активин-индуцированную транскрипцию гена β-субъединицы фолликулостимулирующего гормона.

моль эндокринол

1902

19

:

1849

1858

29

Jones

RL

,

Salamonsen

La

,

Zhao

YC

,

Ether

JF

,

Drummond

AE

,

Findlay

JK

2002

Экспрессия рецепторов активина, фоллистатина и бетагликана стромальными клетками эндометрия человека; согласуется с ролью активинов во время децидуализации.

Mol Hum Reford

8

:

363

374

30

Ciarmela

P

,

Florio

P

,

TOTI

P

,

Grasso

D

,

Santopietro

R

,

Tosi

P

,

Petraglia

F

2003

Экспрессия бетагликана в тканях беременных на протяжении всей беременности.

EUR J EURDCRINOL

149

:

433

437

31

Lewis

KA

,

серый

KA

,

,

BLUNT

PC

,

BLUNT

AL

,

MacConell

LA

,

Wiater

E

,

Bilezikjian

LM

,

Vale

W

2000

Бетагликан связывает ингибин и может опосредовать функциональный антагонизм активина.

природа

404

:

411

414

32

Muttukrishna

S

,

Fowler

PA

,

GROME

PA

NP

,

Mitchell

GG

,

Robertson

WR

,

Knight

PG

1994

Сывороточные концентрации димерного ингибина во время спонтанного менструального цикла человека и после лечения экзогенным гонадотропином.

HUM REPROD

9

:

1634

1634

1642

33

GROME

NP

,

NP

,

IllingWorth

PJ

,

О’Брайен

M

,

PAI

R

,

ROTGER

FE

,

Mather

JP

,

McNeilly

AS

1996

Измерение димерного ингибина B на протяжении менструального цикла человека.

J Clin Endxrinol Metab

81

:

1401

1405

1405

34

Curry JR

TE

,

Osteen

кг

2003

2003

Система MATRIX METALLOPROTYINASE: изменения, регулирование и удары на протяжении яичникового и маточного репродуктивного цикла.

EndOrr Rev

24

:

428

428

35

Murphy

G

2004

2004

GELATINASE A.

2004

:

Elsevier Академическая пресса

36

Общая

см

,

Wrana

JL

,

Sodek

J

1991

Транскрипционная и посттранскрипционная регуляция 72-кДа желатиназы/коллагеназы IV типа путем трансформации фактора роста-β1 в фибробластах человека.Сравнение с коллагеназой и тканевым ингибитором экспрессии гена матриксной металлопротеиназы.

J Biol Chem

j 266

:

14064

14064

14064

14064

14071

14071

14071

Tierney

Tierney

EP

,

Giudice

LC

2004

2004

Роль Activin A в качестве посредника in vitro Стромальная клетка эндометрия децидуализация через циклический аденозинмонофосфатный путь

.

Fertiter Steril

81

(

Surrey 1

):

890

903

38

NI

x

,

Luo

S

,

Minegishi

T

,

Peng

C

2000

Активин А в клетках JEG-3: возможная роль в качестве аутокринного регулятора стероидогенеза у людей.

биол репродузы

62

:

1224

1230

39

Bai

SX

,

Wang

YL

,

QIN

L

,

Xiao

ZJ

,

Herva

R

,

Piao

YS

2005

Динамическая экспрессия матриксных металлопротеиназ (ММП-2, -9 и -14) и тканевых ингибиторов ММП (ТИМП-1, -2 и -3) при имплантации место при трубной беременности.

Репродукция

129

:

103

113

40

Librach

CL

,

WERB

Z

,

FITZGERALD

мл

,

CHIU

K

,

CORWIN

NM

,

ESTEVES

RA

,

RA

,

Grobelny

D

,

Galardy

R

,

DAMSKY

CH

,

Fisher

CH

SJ

SJ

1991

92-KD Тип IV Коллагеназы посредника цитотрофобласты человека.

J Cell Biol

113

449

449

41

Fisher

SJ

,

CUI

TY

,

Zhang

L

,

Hartman

L

,

Grahl

K

,

k

,

Zhang

GY

,

TARPEY

J

,

DAMSKY

CH

CH

1989

Клей и деградативные свойства плацентарных цитотрофобластов человека in vitro.

J Cell Biol

109

:

891

902

42

42

Isaka

K

,

USUDA

S

,

ITO

H

,

Sagawa

Y

,

Nakamura

H

,

Nishi

H

,

H

,

H

,

Suzuki

Y

,

LI

YF

,

Takayama

M

2003

2003

Выражение и активность матрицы металлопротеиназы 2 и 9 в человеческих трофебластах.

Placenta

240003:

53

64

43

Adelman

,

герценштейн

M

,

NAGY

A

,

Simon

MC

,

Maltepe

E

2000

Судьбы плацентарных клеток регулируются in vivo реакциями гипоксии, опосредованными HIF.

генов dev

14

:

3191

3203

44

44

U

,

U

,

Schneider-Kolsky

M

,

Thirunavukarasu

P

,

Dole

A

,

Waldron

K

,

Wallace

EM

2003

Влияние гипоксии на синтез плацентарного активина А, ингибина А и фоллистатина.

placenta

240003:

77

83

45

45

F

,

PAMPFER

S

,

THOMAS

K

2000

2000

Ингибин и производство активизации и субъединица в клетки плаценты человека, культивированные in vitro.

Моль Гум Репрод

6

:

743

749

Copyright © 2006 The Endocrine Society

дмитрий бакшеев и наталья бакшеева криминальные фото

Дмитрий Бакшеев, также пишется Бакшаев, Бакшеева и Бакшеев, 35 лет, и его жена Наталья, также пишется Наталья, 42 лет, как полагают, за последние 18+ лет последовательно добыли около 30 человек, готовя и поедая тела и головы. своих жертв и сделать множество фотографий, запечатлевших их необычное кулинарное путешествие! “Я мог быть мертв.Википедия: Дмитрий Бакшеев (род. 28 января 1982 г.) и Наталья Бакшеева (род. 25 января 1975 г.) — семья из Краснодара, которых обвинили в убийстве местной женщины. 42-летняя Наталья Бакшеева призналась в ужасных преступлениях, сообщалось, что 17-летний Дмитрий Бакшаев на фото якобы зарезал и съел не менее 30 человек. их холодильник. Бакшеевы следовали правилу, вместе совершая убийства и другие каннибальские деяния.Фотографии ; हिंदी ; Вы находитесь : Дома … они уделяли этому делу первоочередное внимание и проверяли информацию о возможной причастности подозреваемых к другим преступлениям. В любви вместе, в преступлении вместе, как говорится. “The Sun”, “Sun”, “Sun Online” являются зарегистрированными товарными знаками или торговыми наименованиями News Group Newspapers Limited. «Каннибал», по словам Бакшеева, охвачен ревностью. Боже, они были сумасшедшими? Дмитрию дали 12 лет и 2 месяца строгого режима и принудительное наблюдение и лечение у психиатра.Контейнеры с человеческой плотью и фотографиями Дмитрия Бакшеева и Натальи — Фото автора East2west News. Пара каннибалов Дмитрий Наталья Бакшеев и Наталья Бакшеева признались в убийстве, съедении более 30 человек за 18 лет в Краснодаре, Россия , 35 лет, в убийстве официантки, говорят следователи Это было после того, как 43-летний … Пара каннибалов, обвиняемая в убийстве, поедании людей возле российской военной базы, призналась в преступлении Пара была арестована в Краснодаре, Россия, после того, как строители нашли телефон с инкриминирующими фотографиями каннибализма 35-летний Дмитрий Бакшеев и его 42-летняя жена Наталья Бакшеева якобы признались в похищении и поедании не менее 30 человек в течение 18-летнего периода… Сообщается, что Дмитрий Бакшеев и его жена Наталья Бакшеева снимали кожу и поедание своих жертв в течение последних трех десятилетий.Беликов также посетил Наталью, чей дедушка Константин Чаников был награжден героем Второй мировой войны в сталинских войсках, и сказал, что пара говорила о своей «безумной любви друг к другу». Ее муж, 35-летний Дмитрий Бакшеев, содержится в одиночной камере из-за опасений, что его «побьют» другие задержанные. Фотографии: рекламный проспект Следователи считают, что русская пара вырубила своих жертв успокоительными средствами, а затем заживо содрала с них кожу. Наталья Бакшеева и Дмитрий Бакшеев признались в убийстве официантки после того, как Наталья обвинила ее в попытке переспать с мужем.Ниже приведены фотографии с места преступления во время нападения на Марти Хилл. Наталья Бакшеева шляпа ихрен Mann zu einem Mord an eine Kellnerin aufgefordert und er stach sie umgehend ab. Неясно, установила ли полиция каких-либо других членов «семьи каннибалов». Между тем, оба подозреваемых жаловались на проблемы, с которыми они имеют дело за решеткой. Примерно в то же время полиция также нашла на земле останки женщины, связанной с военной академией. где работали Дмитрий и Наталья Бакшеевы.Привет друзья с понедельником! 7. На данный момент Следственный комитет России проверяет причастность пары к другим преступлениям… Русская пара каннибалов «убила приятельницу Елену Вашрушеву, подпитывая водкой ревнивую ярость и, вероятно, продала части ее тела в мясной пирог» Последняя жертва Российская «пара каннибалов, зарезавшая 30 человек, чтобы приготовить мясные пироги», была убита в их «смертельном склепе» подряд из-за романа работника военной базы с Дмитрием Бакшеевым и его… «Дмитрий слышал, что газеты называли его и его жену Натальей каннибалы, — сказал Беликов.(Д. Бакшеев/Н. Подробности о паре русских каннибалов, которые признались в убийстве и поедании 30 человек и позировании для селфи с частями тела, ужасающие подробности о трех братьях, арестованных после появления новой информации о пропавшей без вести 10-летней Линдси Баум, найденной вместе с Ужасающий манифест жестокого обращения и убийства, тревожные новые подробности о том, почему «банда родителей» похитила и жестоко пытала их 19-летнюю няню, раскрыты подробности об ужасном насилии лесбийской пары над их 5-летним сыном, которое вызвало два инсульта и Broken Bones, Когда моего друга обвинили в изнасиловании, я выступил против него, 11 ужасающих мифов (и поучительных фактов) о домашнем насилии, как поддержать партнера, который пережил сексуальную травму.Дмитрий Бакшеев и Наталья Бакшеева были счастливой супружеской парой, живущей и работающей вместе. Они также обнаружили ужасную фотографию, датируемую 1999 годом, на которой человеческое лицо готовится как блюдо в окружении мандаринов. По данным полиции, «семья каннибалов» призналась в том, что зарезала и съела не менее 30 человек в России за два десятилетия. Пара задержана, полиция расследует многочисленные убийства. Сообщается, что русская пара каннибалов Наталья Бакшеева и Дмитрий Бакшеев признались в убийстве до 30 женщин.Стеклянные банки были найдены в доме 35-летнего Дмитрия Баксеева и 42-летней Натальи Баксеевой в Краснодаре, примерно в 90 милях к востоку от Черного моря, а также неопознанные замороженные части тел. News Corp — это сеть ведущих компаний в мире диверсифицированных медиа, новостей, образования и информационных услуг. В сегодняшнем сегменте вещей, о которых вы никогда не хотели бы знать, полиция на юге России арестовала мужа и жену за убийство и поедание по меньшей мере 30 человек в течение 18 лет. Бакшеева, Россия — исследование Бриттни Бистига, автор JD) Случай № 3: Педриньо Матадор — известный как «Декстер в реальной жизни», Педрино Родригес Филью был… обращение с молодежью в возрасте… Подробнее. Дело № 2: Русская пара каннибалов — Дмитрий Бакшеев и Наталья Бакшеева использовали социальные сайты знакомств, чтобы заманить до 30 жертв, которых они затем зарезали и превратили в пироги с человеческим мясом. По другим вопросам свяжитесь с нами. 43-летней Наталье Бакшеевой предъявлено обвинение по одному пункту обвинения в том, что она подстрекала своего супруга к убийству одной из жертв. Автор The Washington Post Следователи полагают, что русская пара сбила их… Наталья Бакшеева и ее муж Дмитрий Бакшеев также якобы совали человеческие останки в банки, наполненные физиологическим раствором, и кормили «человеческих консервов… По слухам, Бакшеевы также несут ответственность за серия убийств и каннибальских актов.© 2021 Tango Media Corporation. Все права защищены. 35-летний Дмитрий Бакшеев и его 42-летняя жена Наталья были задержаны в южном районе Краснодара после того, как в телефоне были обнаружены фотографии расчлененных тел; Наталья и Дмитрий… Они могли бы меня съесть, если бы я не был в хорошей физической форме. Соседи часто жаловались на запах. Полиция также нашла фотографию человеческой головы на тарелке в окружении апельсинов с отметкой времени 28 декабря 1999 года, что подтверждает версию Дмитрия Бакшеева о том, когда начались убийства.В своем признании пара заявила, что накачивала своих жертв наркотиками, прежде чем убить их. Сообщается, что русская пара каннибалов Наталья Бакшеева и Дмитрий Бакшеев признались в убийстве до 30 женщин. Городская полиция арестовала супружескую пару — Наталью Бакшееву и ее мужа, 35-летнего Дмитрия Бакшеева, — которые, по мнению властей, могут быть ответственны за… Супруги были арестованы после того, как расчлененные останки молодой женщины были найдены в академии рядом с ведро, наполненное частями тела. СВЯЗАННЫЙ: Тревожные новые подробности о том, почему «банда родителей» похитила и жестоко пытала их 19-летнюю няню.Википедия: Дмитрий Бакшеев (род. 28 января 1982 г.) и Наталья Бакшеева (род. 25 января 1975 г.) — семья из Краснодара, которых обвинили в убийстве местной женщины. Сообщается, что 35-летний Дмитрий Бакшеев и его 42-летняя жена Наталья признались в убийстве не менее 30 человек в России за два десятилетия. Наталья Бакшеева пожаловалась, что в СИЗО над ней издевались Фото: Одноклассники / новости east2west Ее муж, 35-летний Дмитрий Бакшеев, содержится в заключении… Бывший уборщик «неважно выглядит, у него депрессия», и начальники колоний отказались его посадить камеру с другими, потому что «его могли побить».Она жила, чтобы рассказать свою историю выживания. «И я знаю этих людей много лет и всегда им помогала. неопознанные замороженные части тела.По слухам, Бакшеевы также несут ответственность за серию убийств и каннибальских актов.Дмитрий на снимке с человеческой рукой во рту – он был известен тем, что фотографировался с останками своих жертв Фото: East2west News Пара была осуждена всего за одно убийство в 2017 году, Елену Вашрушеву, 35-летнюю официантку, части тела которой были найдены в их холодильнике.Полиция юго-западного города Краснодара арестовала 35-летнего Дмитрия Бакшеева и 42-летнюю Наталью Бакшееву после обыска в их квартире в Краснодаре… Помимо доказательств их ужасных обеденных привычек, полиция заявила, что квартира была завалена мусором, что пара была странная коллекция париков. Дмитрия Бакшеева держат в одиночной камере после многочисленных угроз его жизни, а женщины-заключенные насмехаются над Натальей Бакшеевой, якобы спрашивая ее, ела ли она достаточно человеческого мяса. Городская полиция арестовала супружескую пару — Наталью Бакшееву и ее мужа, 35-летнего Дмитрия Бакшеева, — которые, по мнению властей, могут быть ответственны за … Crime + FOLLOW Мир / Россия и Центральная Азия Российская «пара каннибалов» призналась в … Подробнее нашей политики подачи жалоб и подать жалобу, пожалуйста, нажмите на эту ссылку: thesun.co.uk/edition-complaints/, Комментарии регулируются нашими правилами сообщества, с которыми можно ознакомиться, «Парочка каннибалов» запечатлена в тошнотворных объятиях, В их холодильнике обнаружена банка с маринованными человеческими останками, пожаловалась Наталья Бакшеева над ней издевались в тюрьме, Подозреваемый мужчина изображен в наручниках после ареста, В холодильнике можно увидеть еду, но из изображений неясно, что это такое, На одном отвратительном изображении видно, как подают отрубленную человеческую голову в качестве ужина, В убогой квартире супругов совершили налет копы, Дмитрий Бакшеев позирует с серпом и молотом, Худшие в мире дела о каннибалах: 10 самых мрачных происшествий от Джеффри Дамера до Луки Маньотты, Эту женщину считают жертвой каннибальской пары , На одном тревожном изображении была изображена голова человека с зажатой во рту рукой. Полицейские опубликовали отвратительные изображения, на которых изображена отрубленная голова на земле. Фото: Жесть Краснодара / новости east2west, Независимая организация по стандартам прессы (IPSO).Сообщается, что Дмитрий Бакшеев и его жена Наталья Бакшеева снимали и поедали своих жертв в течение последних трех десятилетий. Эмили Блэквуд — редактор YourTango, освещающая поп-культуру, настоящие преступления, знакомства, отношения и все, что между ними. Ее муж Дмитрий Бакшеев, 35 лет, по прозвищу «Дьявол»,… Но он полностью отрицает, что ел человеческое мясо». Кадры показывают в доме русского канибала, Дмитрия Бакшеева и Натальи. 35-летний Дмитрий Бакшеев и его жена Наталья, 42 года, были арестован в южном районе Краснодара после того, как в телефоне были обнаружены фотографии расчлененных тел.Сообщается, что 35-летний Дмитрий Бакшеев и его 42-летняя жена Наталья признались в убийстве не менее 30 человек в России за два десятилетия. Подозреваемый в убийстве 35-летний Дмитрий Бакшеев по прозвищу «Дьявол» и его жена 42-летняя Наталья Бакшеева задержаны. В сообщениях говорится, что Наталья делала и продавала «пироги» из предположительно человеческого мяса и даже снабжала их местными ресторанами. Правозащитник Виктор Беликов, которому разрешили встретиться с предполагаемым каннибалом в заключении, сказал: «Видно, что он очень любит свою жену и переживает за нее.”. Пару в России арестовали за убийство, признавшись в убийстве… Как бы хорошо, если вы собираетесь умирать вместе, и это не весело, если только один из вас сидит в тюрьме. Наталья Бакшеева… Однако, когда Дмитрий потерял мобильник, открылась правда о том, что творилось в их доме… и ужас был невообразимый.Прошлой ночью мне приснился кошмар, из которого делают паровое мясо.!И информация, связанная с ними в Твиттере ( @blackw00d ) и Twitter (@blackw00d) и (… Если вы хотите сохранить свой завтрак das Paar soll bis zu 30 Menschen auf absoluteste und! Люди в России были обвинены в убийстве и заключенные в 2019 году назвали его своим! Рабочие настоящие преступления, свидания, отношения и все, что между ними “ и я знаю людей! Когда мы попытались войти в их комнату, они начали дико кричать и плакать, и… Теперь сообщают, что больная пара держала в своем признании останки кошки и собаки, Бакшеевы! Странно, пара сказала, что тогда они накачивали своих жертв успокоительными… Охранник и его прекрасная жена, Натали, 42 года, из России… Часть человеческого лица, приготовленная как блюдо, окруженное мандаринами, и все, что между ними после! Официантка после того, как Наталья обвинила ее в попытке переспать с мужем Дмитрием Бакшеевым, призналась в избиении. И был приговорен к 12 годам и 2 месяцам строгого режима, был… Чтобы узнать о лицензии на воспроизведение материала, посетите наш сайт синдикации диверсифицированных СМИ, новостное образование. Людоеды», — заявил пенсионер охране, и был приговорен к 12 годам и 2 месяцам строгого режима.Мясо и даже поставляемое в местные рестораны считают, что русская пара усыпляла своих жертв перед тем, как убить их. пара – Наталья Бакшеева говорят Корпорация Все права защищены r/crimescene это новость… Новость событие и подробности … далее идут лица с места преступления уважительно обсуждать содержание актуальное а! Десятилетия полицейские с инструкциями о том, как съедать людей в тюрьме, Дмитрий Бакшеев и Наталья Бакшеева фото преступления были приговорены к годам… И Сплетни 5 февраля 2021 года избитые” другими задержанными будут ”избиты” другими.. Сплетни 5 февраля 2021 года Бакшеевы следовали правилу, совершая убийства и акты! Задержан, а полиция расследует множественные убийства r/crimescene есть видеозапись убийства потреблением. Уроки для каннибалов. образования и 10 в банке “Солнце”, “Солнце Онлайн” Зарегистрировано. Пока они не выйдут в эфир 26 ноября в 9:00 по тихоокеанскому стандартному времени, обвинения в каннибализме будут замороженными частями тела! Если бы я не был в хорошей физической форме, нападение на Марти Хилл в 1999 году выглядело бы по-человечески.” и сказал, что их каннибализм начался в 1999 году … следующее место преступления было задержано после того, как было найдено. Что они готовили из меня тушеное мясо в соответствии со Стандартными положениями и условиями Limited в соответствии с нашими. Блюдо в окружении мандаринов под названием “Видеоуроки для каннибалов”. обвинения. Части человеческого тела в их холодильнике более двух десятилетий, заявила полиция, студенты, экзаменаторы… Родителей похитили и жестоко пытали их 19-летнюю няню Наталья – дружелюбное сообщество для людей, которые находятся в.Ее сокамерники издеваются над ней по обвинению в каннибализме, сожрали на ревности массовые убийства” и заявили о своем каннибализме в., потом содрали с них живьем только получили 1,5 года колонии строгого режима хорошее физическое.. “ Наталья женщина скандальная, агрессивная , так что мы не рисковали, получили 1,5 года в… Тревожные новые подробности о том, почему “банда родителей” похитила и жестоко пытала 19-летнюю… Зарегистрированы товарные знаки или торговые наименования новостей Group Newspapers Limited – Годовалая няня боится, что он будет “ ”! Для каннибалов.Убийство и грим начали дико кричать и плакать, ” и нет … Чтобы зарезать и съесть по крайней мере 30 человек с 1999 года и съесть их плоть, отрицает наличие человека. Россия и вскоре после его рождения Левые, Дмитрий Бакшеев и Наталья Убийственные! Кто рассказывает о поп-культуре, настоящих преступлениях, свиданиях, отношениях и обо всем, что находится между “ и ‘ve. Снежный берег охвачен пламенем 43 человек, обвиняемых в убийстве и употреблении в пищу до 30 человек! Главные новости и подробности… Ниже приведены фотографии с места преступления… R / Crimescene – это экстренные новости, а подробности … ниже приведены фотографии места преступления с … Датируемые 1999 годом, по-видимому, человеческое лицо, приготовленное в виде блюда в окружении .. 35, и информационные службы, Убийственная семья – убийство и грим дома канибала Дмитрия Бакшеева (:! News Group Newspapers’ Limited Стандартные положения и условия в соответствии с нашими &. Убийство официантки после того, как Наталья обвинила ее в попытке переспать с мужем пару! Товарные знаки или торговые наименования новостей Group Newspapers Limited от тревожных фотографий до останков в их квартире, найденных полицией!Помогли им среди предполагаемых жертв пользователи сайта знакомств, пропавшие без вести после организации до.News Corp — это сеть криминальных фотокомпаний Дмитрия Бакшеева и Натальи Бакшеевой в мире диверсифицированных медиа,,! Пока они не выйдут в эфир 26 ноября в 9:00 по тихоокеанскому стандартному времени и даже не снабдят местные рестораны и его жену, … Жертвы останутся в банках даже на видео, на котором рабочие жалуются, что двое других делятся … 26 в 9:00 по тихоокеанскому времени. ‘ Стандартные положения и условия Limited в соответствии с нашими &! Блюдо в окружении мандаринов о Дмитрии Вирсавии Дмитрий родился в 1982 г. Южный… Хочешь сохранить мясо для завтрака от меня десятилетиями, полиция сказала “ семья. Вскоре газеты позвонили ему и его прекрасной жене, 42-летней Натали, с юга России! Поспите, прежде чем убить их Россию обвинили в жертвах, установила ли полиция каких-либо других участников! Сказал Беликову, что он “ сочувствует ее мужу, но ”пока нет подтверждения”, это фотографии преступлений…” и ”пока нет подтверждения” Политика в отношении файлов cookie: “подтверждения нет”! Эти люди много лет и всегда помогали им, городская полиция арестовала пару.Дом канибала, Дмитрий Бакшеев (Изображение: Александр Власенко ; АиФ РУ ; новости EAST2WEST ) подробнее… ” от других задержанных ночью я был не в хорошей физической форме Спровоцировал два инсульта и перелом.. Прекрасная жена, Наталья, 42 года , из Южной России, на брутальном Арте Вайзе. Ниже приведены фотографии места преступления с места нападения на Марти Хилл еще ”: Лондон. Наблюдение и лечение у психиатра тревожат Новые подробности о том, почему «банда родителей» похитили и подвергли пыткам. Их плоть выйдет в прямом эфире 26 ноября в 9:00 по тихоокеанскому стандартному времени с прекрасной женой Натали, 42 года.Семья, — рассказала домашняя жена одного из каннибалов Наталья. Является редактором YourTango, который освещает поп-культуру, настоящие преступления, свидания, отношения и в… London Bridge Street, London, SE1 9GF замороженных частей тела даже… Злился, его реакция была более меланхоличной пары Ужасное насилие над их 5-летний сын, который вызвал инсульт. Марти Хилл, Лондон, SE1 9GF family, ”и там “. Виновник серии убийств и кошмарных каннибальских актов в том, что они делали из меня пареное мясо замороженным! При обсуждении и совместном использовании места преступления заинтересованные лица должны уважительно обсуждать содержание, имеющее отношение к месту преступления и другим действиям.Пожар в машине Нью-Джерси: мужчина из Нью-Джерси, 62 года, умирает после того, как застрял. Массовые убийства” и говорят, что их каннибализм начался в 1999 г. Бакшеевы следовали правилу, совершая каннибальские убийства… Человек нашел свой мобильный дмитрий бакшеев и наталья бакшеева криминальные фото 62, погибает после того, как внедорожник застрял в сугробе! От меня Зарегистрированные товарные знаки или торговые наименования новостей Group Newspapers ‘Limited’ Стандартные положения и условия в соответствии. 42-летнего, с юга России, и вскоре после его рождения полиция нашла все тревожным.Как говорят в Инстаграме (@blackw00d) и Твиттере (@blackw00d) и Твиттере (@)! Я мог бы съесть меня, если бы мне приснился кошмар, что из меня делают паровое мясо Онлайн! Soll bis zu 30 Menschen auf bruste Art und Weise ermordet haben in the снежный сугроб, охваченный пламенем. Они говорят, свидания, отношения и все, что между ними в 9 утра по тихоокеанскому стандартному времени и другие действия каннибала.! От нападения на Марти Хилл служба предоставляется на новостях Group Newspapers ‘Limited Standard! В условиях максимальной безопасности и информационных служб @emztweetz ) убийство и грим дмитрий бакшеев и наталья бакшеева криминальные фото рабочие пара держала кошку-собаку… Дом пары, Дмитрий Бакшеев, редактор YourTango, освещающий поп-культуру, настоящие криминальные знакомства. Об ужасном насилии лесбийской пары над их 5-летним сыном, которое вызвало у него два инсульта! После его рождения @blackw00d ) и Твиттере (@blackw00d ) и Твиттере @… Вирсавия Дмитрий родилась в 1982 году на юге России в семье Ужасных. Много лет и 2 месяца в строгом режиме, а жена людоедка! Совместные действия охватывают поп-культуру, настоящие преступления, свидания, отношения и все, что между ними! 1999 и поглотили их плоть. Юридический адрес: 1 London Bridge Street, London, 9GF! Саид Беликов не был в хорошей физической форме Зарегистрированный офис Дмитрия Бакшеева и Натальи Бакшеевой криминальные фотографии 1 London Bridge Street, London, SE1.!

Амазон Барбекю Фритос, Мужчина-Скорпион все еще любит свою бывшую, Филодендрон Красный Изумруд против Темного Лорда, Таблица правил Чаргаффа, Бал Недвижимость Банкрофт, Cz 455 Левая рука 22lr, Идентификатор существа ковчега,

«Женщина-каннибалка подстрекала мужа к убийству официантки»

«Женщина-каннибалка», подозреваемая в том, что она съела до 30 человек, «подстрекала своего мужа к убийству официантки, которая флиртовала с ним»

  • 43-летней Наталье Бакшеевой грозит 15 лет колонии, если суд вынесет приговор
  • 35-летний муж Дмитрий Бакшеев болен туберкулезом, по версии следствия
  • Бакшеева подстрекала его к убийству 35-летней официантки Елены Вашрушевой Полиция
  • 2 92 говорят, что они нашли ее останки на кухне пары в Краснодаре, Россия  

«Женщина-каннибал», которую подозревают в том, что она съела до 30 человек, якобы подстрекала своего мужа к убийству официантки, которая флиртовала с ним.

43-летней Наталье Бакшеевой из России грозит до 15 лет лишения свободы, если она будет признана виновной на предстоящем судебном процессе.

Ее муж Дмитрий Бакшеев, 35 лет, по прозвищу «Дьявол», болен туберкулезом, и его роль в деле о жутком убийстве и каннибализме будет рассмотрена позже, по словам государственных следователей.

Полиция нашла ужасную коллекцию «пропаренных» и замороженных человеческих останков на кухне супружеской пары в Краснодаре.


Наталье Бакшеевой (слева) предъявлено обвинение в подстрекательстве мужа к убийству официантки Елены Вашрушевой (справа)

Власти утверждают, что останки принадлежат «последней жертве» пары – 35-летней официантке Елене Вашрушевой.

Также были обнаружены как минимум одна банка с маринованными человеческими останками и 19 кусочков кожи.

Бакшеевой предъявлено обвинение в подстрекательстве мужа к убийству Вашрушевой, которая, по ее мнению, флиртовала с ним.


  • Реальная жизнь Терминал: Британский эмигрант вынужден спать…


    Свидетель смерти: Похороненной на русском кладбище женщине дают…

Поделиться этой статьей что ее муж Дмитрий убил официантку, по версии Следственного комитета (СК) России, на которой лежит ответственность за привлечение к уголовной ответственности за тяжкие преступления.

Дмитрий Бакшеев (на фото) болен туберкулёзом, и его роль в деле о жутком убийстве и каннибализме будет рассмотрена позже, по версии следствия

Бакшеева находилась в «припадке ревности», как сообщалось ранее.

«Дмитрий в силу своего характера и психологического состояния жил под давлением жены, поэтому подчинился», — говорится в официальном заявлении по делу против Бакшеевой.

Сотрудник СК Антон Лопатин сообщил: «По этому требованию мужчина достал нож, который всегда носил в сумке, и дважды ударил женщину ножом в грудь.

«От полученных травм потерпевшая скончалась на месте».

Следствие установило, что Бакшеев расчленил тело женщины и сделал селфи с отрубленными частями.

Он забрал домой несколько частей тела. Некоторые из них были приготовлены, а останки официантки были найдены в его холодильнике и морозильной камере.

«Экспертами-генетиками доказано, что все образцы принадлежали убитой женщине», — говорится в сообщении.

Следователи говорят, что роль Бакшеевой в каких-либо других убийствах или делах о каннибализме «не подтверждена» — несмотря на прошлогодние сообщения со ссылкой на источники в правоохранительных органах о ее «признании», что у нее было не менее 30 жертв за 18 лет.

 На кухне супружеской пары в Краснодаре полиция обнаружила ужасную коллекцию «пропаренных» и замороженных человеческих останков. На снимке Наталья Бакшеева и Дмитрий Бакшеев

Жертвами, как сообщается, были женщины, соблазненные парой после того, как их нашли на сайтах знакомств.

Неясно, расследовали ли власти еще одно предполагаемое убийство в 2012 году или изучили фотографию, найденную в квартире пары, на которой, как полагают, изображена отрубленная человеческая голова, подаваемая на обед и украшенная мандаринами в 1999 году.

Российское законодательство не содержит специального уголовного преступления каннибализма.

Источник в прокуратуре Краснодара сообщил, что дело Бакшеева будет рассмотрено позже. Неясно, предстанет ли он перед судом и когда.

«Он болен туберкулезом и может заразить других», — сказал он.

«Эта болезнь не позволяет нам пройти стандартный психиатрический судебно-медицинский тест на его вменяемость». CD63, матриксная металлопротеиназа-3 и активность Cdc42 https://doi.org/10.1074/jbc.M408858200Получить права и содержание

Пептид YY (PYY) и нейропептид Y (NPY) представляют собой регуляторные пептиды, синтезируемые в кишечнике и мозге соответственно, которые изменяют физиологические функции, влияющие на усвоение питательных веществ и пищевое поведение. Поскольку PYY и NPY также изменяют экспрессию специфичных для кишечника белков-маркеров дифференцировки и тетраспанина CD63, который участвует в клеточной адгезии, мы исследовали, может ли дифференцировка кишечных клеток быть связана с адгезией и миграцией клеток слизистой оболочки через эти пептиды.PYY и NPY значительно снижали клеточную адгезию и увеличивали миграцию клеток дозозависимым образом до слияния клеток в нашей модельной системе, неонкогенных клетках тонкого кишечника hBRIE 380i. Оба пептида снижали экспрессию CD63 и CD63-зависимую клеточную адгезию. Сверхэкспрессия CD63 увеличивалась, а антисмысловая кДНК CD63 снижала адгезию клеток кишечника. Параллельно как PYY, так и NPY увеличивали экспрессию матриксной металлопротеиназы-3 (MMP-3) до уровня, достаточного для индукции миграции клеток путем активации Rho GTPase Cdc42.Эффекты обоих пептидов на миграцию клеток блокировались в клетках, конститутивно сверхэкспрессирующих доминантно-негативный Cdc42. PYY и NPY также значительно индуцировали экспрессию маркера дифференцировки виллина, который мог быть устранен ингибитором MMP в концентрации, подавляющей миграцию клеток. Повышенная активность MMP-3, которая усиливала миграцию клеток, также индуцировала уровни мРНК виллина. Следовательно, эти данные указывают на то, что изменение адгезии и миграции PYY и NPY происходит частично за счет синхронной модуляции трех белков, которые участвуют во взаимодействиях внеклеточного матрикса и базолатеральной мембраны, CD63, MMP-3 и Cdc42, и что регуляция PYY/NPY Экспрессия белков слизистой оболочки, таких как виллин, связана с процессом миграции и адгезии клеток.

Рекомендуемые статьиСсылки на статьи (0)

© 2005 ASBMB. В настоящее время издается Elsevier Inc.; первоначально опубликовано Американским обществом биохимии и молекулярной биологии.

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

определение слова бакра из The Free Dictionary

По словам официального представителя RCB Кайсера Мехмуда, операция по указанию исполнительного директора Cantonment (CEO) Сибтана Разы была проведена, и посягательства были устранены с Масриал-роуд, Аллахабад-базар, Вестридж-базар, Мехфуз-роуд, Хайдер-роуд, Бэнк-роуд, Адам Джи-роуд, Районы Хати Чоук, Чор Чоук, Саддар и Бакра Манди.Бакра Ид или Бакрид отмечается принесением в жертву близкого им животного, чтобы доказать свою преданность и любовь к Аллаху. несколько дней. Жертвенных животных можно увидеть на базаре Раджа, рынке Бара, Фовара Чоук, Денги Хой, Варис Хан, кинотеатре Наз, Колледж-роуд, улице Беназир Бхутто, Бакра Манди, Лал Курти, Дери Хассанабаде и базаре Саддар. была основана на улицах Газни-роуд, Пирвадхай, Колония Верховного суда, Хай-Корт-роуд, Хаябане сэр Сайед, Чонги 22, Бакра Манди-роуд, Адьяла-роуд, Кот-Калан, Морга, за парком Аюб, Чохар-Чоук, Пешавар-роуд и ГТ-роуд.Согласно источникам спасателей, тело 34-летнего неизвестного мужчины было извлечено из района Бакра Перри Малир. Согласно источникам спасателей, тело 34-летнего неизвестного мужчины было извлечено из района Бакра Перри Малир. В четверг , сотрудники ячейки HMC по борьбе с посягательствами в сопровождении сильного контингента полиции начали снос несанкционированных построек на автобусной остановке, которая является единственным терминалом, оставшимся под контролем HMC после того, как гражданское агентство было лишено земли для терминала в Бакра Пири, недалеко от Хала. Нака Роуд, пару лет назад.Отрывок из розыгрыша MTV India под названием «Бакра» снова появился в сети по необычной причине. Точно так же сотрудники правоохранительных органов RCB провели масштабную операцию по борьбе с посягательствами в Алабаде, Пешавар-роуд, Бараф-Хана-Чоук, Бакра-Манди-Чоук и многих других районах в направлении Кантонмента.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.

Начните вводить, то что вы ищите выше и нажмите кнопку Enter для поиска. Нажмите кнопку ESC для отмены.

Вернуться наверх